Fare copie del DNA richiede enzimi chiamati DNA polimerasi. Questi enzimi conservano un genoma durante la replicazione. Prima degli anni '60, gli scienziati non avevano una DNA polimerasi termostabile da usare per fare più copie del DNA. Nel 1966, nelle frizzanti sorgenti calde del Parco Nazionale di Yellowstone negli Stati Uniti, Thomas D. Brock scoprì un batterio, chiamato termofilo, che poteva sopravvivere a temperature estremamente elevate e lo chiamò Thermus aquaticus. TL; DR (troppo lungo; non letto) Taq polimerasi, la prima DNA polimerasi termostabile per La PCR è stata scoperta nel 1966. La PCR ha trasformato l'amplificazione del DNA, rendendo il processo rapido ed efficiente. Ciò rivoluzionerebbe la clonazione, il test del DNA, la medicina legale e il design della medicina. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata sviluppata dal chimico Kary Mullis negli anni '80, come mezzo per realizzare molte copie di frammenti di DNA. Gli scienziati hanno capito che il DNA polimerasi termostabile (stabile al calore) sarebbe stato necessario affinché la PCR funzionasse in modo efficiente. Taq Nella PCR, un campione di DNA è combinato con primer, che sono sequenze di acidi nucleici che avviano la sintesi del DNA; Taq Alla fine, piuttosto che isolare Taq La capacità di usare un piccolo pezzo di DNA e copiarlo milioni di i tempi tramite PCR hanno trasformato la biologia molecolare. Il test per i background genetici e i difetti genetici richiede solo un piccolo campione, ma fornisce enormi quantità di informazioni cruciali che aiutano la ricerca in medicina e antenati. La PCR è stata anche utilizzata per rilevare l'HIV nelle cellule umane, aprendo il campo dell'epidemiologia a beneficio della rapida amplificazione del DNA. Gli scienziati forensi usano regolarmente la PCR, isolando le prove del DNA da ciocche di capelli o piccoli campioni di sangue e aiutando così a combattere il crimine. Anche i fossili possono produrre frammenti di DNA che possono essere replicati più volte, fornendo informazioni sull'evoluzione. Il potere della Taq
L'isolato la polimerasi di questo organismo è stata chiamata Taq
polimerasi.
Polymerase Chain Reaction (PCR)
polimerasi, essendo termostabile, si è rivelato ideale per PCR.
polimerasi; e trifosfati nucleotidici (dNTP). Questa miscela viene posta in provette all'interno di una macchina PCR automatizzata. La combinazione viene riscaldata a 94 gradi Celsius, il che provoca la denaturazione o lo scioglimento del DNA e diventa due filamenti di DNA a singolo filamento (ssDNA). La miscela viene quindi raffreddata a 55 ° C, a quel punto i primer ricotturano alla parte del DNA che deve essere replicata. La combinazione viene nuovamente riscaldata, ma a 72 gradi C, che è la temperatura ideale per Taq
polimerasi per utilizzare i primer per creare nuovi filamenti di DNA e le riforme dell'elica. Questo processo, che si svolge in pochi minuti, viene ripetuto più volte per creare milioni di copie di pezzi di DNA. La Cetus Corporation ha sviluppato una macchina per il termociclaggio, o termociclatore, che ha accelerato il processo di riscaldamento e raffreddamento dei campioni.
polimerasi da Thermus aquaticus
cellule, il gene pol
da quel batterio è stato isolato e clonato per produrre il suo genoma in Escherichia
coli (E. coli)
cellule. Mentre sono state scoperte nuove polimerasi di DNA termostabili, Taq
polimerasi rimane lo standard per PCR.
Una rivoluzione della biologia molecolare
polimerasi stabile al calore ha portato a un vasto e inestimabile progresso nella scienza.