Come nel caso di qualsiasi strumento scientifico, è necessario assicurarsi che lo strumento funzioni correttamente prima di utilizzarlo per analizzare un campione. Il controllo della risposta dello strumento per un campione noto verifica che lo strumento sia calibrato correttamente. Gli spettrofotometri richiedono una calibrazione periodica per assicurare una risposta corretta dello strumento. Gli spettrofotometri a infrarossi (IR) utilizzano il polistirene come standard di calibrazione. Una scansione dello strumento con un pezzo di polistirolo nel supporto del campione verificherà la presenza di picchi osservati negli spettri IR e l'intensità relativa dei picchi.
Accendere lo spettrofotometro e lasciarlo scaldare per almeno 10 minuti. Il tempo di riscaldamento è necessario affinché la sorgente si stabilizzi. Senza una fonte stabile, non puoi fare affidamento sugli spettri ottenuti. Il segnale analitico si basa sull'attenuazione della radiazione sorgente dal campione.
Eseguire lo standard di calibrazione posizionando un pezzo di pellicola di polistirene nel porta campioni. Senza un test eseguito utilizzando un campione di spettri noti chiamato standard, non si ha la certezza che lo spettrofotometro funzioni correttamente.
Recupera gli spettri per il campione di polistirolo. Confronta gli spettri con quello in un riferimento standard di spettri IR. Assicurati che tutti i picchi previsti siano presenti negli spettri di prova. La posizione dei picchi deve essere allineata con la lunghezza d'onda dell'assorbimento.
Controllare gli spettri per accertarsi che la forza del segnale sia entro il 95 percento del massimo per il picco più forte. Se il picco più forte negli spettri è più o meno del fondo scala, regolare l'attenuazione per fornire la corretta intensità del segnale.
Calibrare lo spettrofotometro IR spesso. Una frequenza minima di calibrazione dovrebbe includere una scansione appena prima e una subito dopo il lavoro per il giorno.