La generazione della miscela metabolica di fase I di un farmaco è seguita dalla separazione cromatografica dei metaboliti. Una suddivisione dirige l'eluente alla MS per l'identificazione del composto e al nanofrazionamento su una piastra da 384 pozzetti per il dosaggio biologico. Finalmente, viene ricostruito un cromatogramma del saggio biologico e viene eseguito il confronto con i dati MS ottenuti in parallelo. Attestazione:Jeroen Kool
Un nuovo articolo di ricerca originale (e disponibile gratuitamente) di Barbara M. Zietek et al., ora disponibile prima della stampa su Scoperta SLAS In linea, presenta un veloce, metodologia robusta e accurata per correlare l'identità del composto alla potenza del CYP1A2 degli inibitori nelle miscele metaboliche.
La metodologia è incentrata su una piattaforma di nanofrazionamento in linea in cui una miscela metabolica viene separata cromatograficamente seguita da un'analisi di spettrometria di massa (MS) in linea parallela e un nanofrazionamento in linea su piastre di microtitolazione ad alta densità che vengono quindi direttamente esposte a un saggio biologico.
La correlazione dei cromatogrammi di bioattività ricostruiti con i dati MS consente l'identificazione diretta di composti con proprietà inibitorie verso gli enzimi CYP1A2, indicando interazioni farmacologiche coinvolte dal CYP. In modo simile, la metodologia può essere implementata nel dosaggio di miscele metaboliche per altri CYP rilevanti nella scoperta di farmaci. Accanto al tradizionale profilo metabolico Met-ID, l'approccio presentato in questo nuovo articolo fornisce profili diretti del contributo relativo di ciascun metabolita all'attività saggiata, in questo caso inibizione del CYP1A2.
Le interazioni farmacologiche causate dall'inibizione degli enzimi CYP450 (o CYP) possono portare a gravi reazioni avverse nei pazienti. Queste proprietà inibitorie possono essere esibite dai composti progenitori e dai loro metaboliti. Insieme, le proprietà di uno o più metaboliti possono superare i benefici di un candidato farmaco, portando così al suo fallimento nella fase di sviluppo del farmaco o alla rimozione dal mercato farmaceutico dopo l'introduzione.
Negli ultimi anni, l'aumento del logoramento del farmaco (candidato) si osserva soprattutto nelle fasi successive dello sviluppo del farmaco. Questo processo può essere migliorato implementando nuovi metodi di screening che valutano rapidamente le proprietà biologiche/biochimiche e le correlano direttamente alle identità dei composti. Questo può fornire rapidamente profili delle proprietà farmacocinetiche di un farmaco e dei suoi metaboliti insieme alle loro proprietà biologiche e può essere ottenuto con la metodologia presentata in questo articolo.
