Durante la cromatografia su strato sottile un tecnico posiziona i punti di una miscela chimica su una piastra piana rivestita con uno strato di materiale assorbente e quindi colloca la parte inferiore della piastra in solvente. Quando il solvente si solleva, le sostanze chimiche presenti nella miscela si muovono con essa a ritmi diversi, quindi si separano. Questo test può determinare quali sostanze chimiche sono in una miscela confrontando i tassi di viaggio delle incognite con gli standard noti. I risultati, tuttavia, possono essere influenzati da molti fattori.
Fattori di conservazione
Il fattore di ritenzione per una sostanza chimica durante la cromatografia su strato sottile è una misura di quanto si sposta sulla lastra in risposta a il movimento del solvente. Poiché il movimento assoluto della sostanza chimica dipende da quanto è stato permesso al solvente di viaggiare, i valori del fattore di ritenzione sono calcolati in relazione al grado di movimento del solvente. Il fattore di ritenzione per una sostanza chimica è la distanza verticale spostata dalla sostanza chimica dal punto in cui era originariamente applicata alla piastra, divisa per la distanza percorsa dal solvente, misurata dallo stesso punto di partenza.
Strato sottile Piastra per cromatografia
La lastra per cromatografia su strato sottile può influenzare il valore del fattore di ritenzione ottenuto per una determinata sostanza chimica. Le piastre per cromatografia su strato sottile possono essere rivestite con una varietà di solidi assorbenti; più frequentemente silice o allumina. Poiché il fattore di ritenzione si basa sull'affinità relativa della sostanza chimica per l'assorbente rispetto al solvente, la modifica dell'assorbente può modificare notevolmente il fattore di ritenzione. Inoltre, lo spessore e l'uniformità dello strato assorbente possono variare da piastra a piastra, specialmente se sono fatti a mano, il che a volte è il caso. Questi due fattori possono anche modificare il valore del fattore di ritenzione per i prodotti chimici.
Solventi
Poiché il solvente trasporta la sostanza chimica sulla lastra, anche il particolare solvente utilizzato avrà un impatto sostanziale sul fattore di ritenzione valore per la sostanza chimica. Un solvente che ha un'interazione più forte per una particolare sostanza chimica supererà più facilmente qualsiasi affinità della sostanza chimica per lo strato assorbente e trasferirà quella sostanza chimica più lontano in un dato periodo di tempo. Le miscele di solventi possono anche avere effetti diversi a seconda della proporzione di ciascun solvente.
Altri fattori
In alcuni casi ci sono alcuni altri fattori che possono influire sul fattore di ritenzione. La temperatura del solvente e della piastra può apportare lievi modifiche, poiché, ad esempio, il solvente può spesso dissolvere meglio i prodotti chimici che trasporta a temperature più elevate. La tecnica del tecnico nell'applicare il campione alla piastra può anche modificare il fattore di ritenzione. Un effetto potenziale è che l'applicazione di un campione eccessivo comporta la formazione di ampie e diffuse bande di sostanze chimiche che si spostano verso l'alto sulla piastra, rendendo difficile misurare con precisione la distanza di trasporto della sostanza chimica.