1. Tinking Dye:
* Questo componente consente di tracciare visivamente l'avanzamento dell'elettroforesi.
* È una tintura colorata che migra attraverso il gel a una velocità prevedibile.
* Esempi comuni includono:
* blu bromofenolo: Migra a una velocità simile a un frammento di DNA da 300-400 bp.
* xilene cianolo ff: Migra a una velocità simile a un frammento di 4-6 kb di DNA.
2. Glicerolo/saccarosio:
* Questo componente rende il campione più denso rispetto alla soluzione tampone, quindi affonda nel pozzo e non si diffonde.
* Ciò garantisce che il campione sia caricato correttamente e rimanga concentrato nella parte inferiore del pozzo.
3. Buffer:
* Questi componenti aiutano a mantenere il pH del campione e la soluzione tampone durante l'elettroforesi.
* Assicurano la corretta funzione degli enzimi coinvolti nel processo.
* Esempi includono tamponi Tris-Borate-EDTA (TBE) o Tris-Acetate-EDTA (TAE).
4. Altri additivi (opzionali):
* SDS (dodecil solfato di sodio): Questo detergente viene spesso aggiunto ai campioni di proteine per denaturarli e ricoprirli con una carica negativa, permettendo loro di migrare in base alle loro dimensioni.
* Riduzione degli agenti: Come il ditiotreitolo (DTT) o il β-mercaptoetanolo, vengono talvolta aggiunti per rompere i legami disolfuro all'interno delle proteine, denaturandoli ulteriormente.
Punti chiave da ricordare:
* La composizione specifica del colorante di carico può variare a seconda del tipo di elettroforesi da eseguire (DNA, RNA o proteina).
* La scelta del tintura di monitoraggio dovrebbe essere appropriata per l'intervallo di dimensioni delle molecole analizzate.
* Il colorante a caricamento deve essere usato con parsimonia per evitare di introdurre troppo volume ai pozzi, il che può influire sulla risoluzione della banda.
Fammi sapere se hai altre domande!
