Spesso i chimici usano uno strumento noto come spettrometro UV-Vis visibile in ultravioletto o UV-Vis per misurare la quantità di radiazione ultravioletta e visibile assorbita dai composti. La quantità di radiazione ultravioletta o visibile assorbita da un composto dipende da tre fattori: la concentrazione, c, del campione; la lunghezza del percorso, l, del portacampioni, che determina la distanza su cui il campione e la radiazione interagiscono; e il coefficiente di assorbimento molare, e, a volte indicato come il coefficiente di estinzione molare. L'equazione è indicata come A = ecl ed è nota come legge di Beer. L'equazione contiene quindi quattro variabili e per determinare uno qualsiasi dei quattro richiede valori noti per tre.

Calcoli

Determina l'assorbanza per il composto alla lunghezza d'onda desiderata. Questa informazione può essere estratta dallo spettro di assorbanza prodotto da qualsiasi strumento UV-Vis standard. Gli spettri sono normalmente tracciati come assorbanza rispetto alla lunghezza d'onda in nanometri. Generalmente, l'apparenza di "picchi" nello spettro indica le lunghezze d'onda di interesse.

Calcola la concentrazione del campione in moli per litro, mol /L, nota anche come molarità, M. L'equazione generale per molarity is

M = (grammi di campione) /(peso molecolare del composto) /litri di soluzione.

Ad esempio, un campione contenente 0,10 grammi di tetrafenilciclopentadienone, con un peso molecolare di 384 grammi per mole, disciolti e diluiti in metanolo fino a un volume finale di 1,00 litri presenterebbero una molarità di:

M = (0,10 g) /(384 g /mol) /(1,00 L) = 0,00026 mol /L.

Determina la lunghezza del percorso attraverso il portacampioni. Nella maggior parte dei casi, questo è di 1,0 cm. Sono possibili altre lunghezze di percorso, in particolare quando si tratta di contenitori per campioni destinati a campioni gassosi. Molti spettroscopisti includono la lunghezza del percorso con le informazioni del campione stampate sullo spettro di assorbanza.

Calcola il coefficiente di assorbimento molare secondo l'equazione A = ecl, dove A è l'assorbanza, c è la concentrazione in moli per litro e l è la lunghezza del percorso in centimetri. Risolto per e, questa equazione diventa e = A /(cl). Continuando l'esempio del passaggio 2, il tetrafenilciclopentadienone presenta due massimi nel suo spettro di assorbanza: 343 nm e 512 nm. Se la lunghezza del percorso era di 1,0 cm e l'assorbanza a 343 era 0,89, quindi

e (343) = A /(cl) = 0,89 /(0,00026 * 1,0) = 3423

E per l'assorbanza di 0,35 a 512 nm,

e (512) = 0,35 /(0,00026 * 1,0) = 1346.