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    Come calcolare Km

    Nelle reazioni biologiche, gli enzimi funzionano in modo molto simile ai catalizzatori, fornendo percorsi alternativi per le reazioni che si verificano e accelerando il processo complessivo. Un enzima funziona all'interno di un substrato e la sua capacità di aumentare la velocità della reazione dipende da quanto bene si lega al substrato. La costante di Michaelis, indicata con K M, è una misura dell'affinità enzima /substrato. Un valore più piccolo indica un legame più stretto, il che significa che la reazione raggiungerà la sua velocità massima a una concentrazione inferiore. K M ha le stesse unità della concentrazione del substrato ed è uguale alla concentrazione del substrato quando la velocità della reazione è alla metà del suo valore massimo.
    Il diagramma di Michaelis-Menten

    La velocità di un la reazione catalizzata da enzimi è una funzione della concentrazione del substrato. Per ricavare un diagramma per una particolare reazione, i ricercatori preparano diversi campioni di substrato a diverse concentrazioni e registrano il tasso di formazione del prodotto per ciascun campione. Un diagramma di velocità (V) vs. concentrazione ([S]) produce una curva che sale rapidamente e si livella alla massima velocità, che è il punto in cui l'enzima sta lavorando il più velocemente possibile. Questo è chiamato diagramma di saturazione o diagramma di Michaelis-Menten.

    L'equazione che definisce il diagramma di Michaelis-Menten è:

    V \u003d (V max [S]) ÷ (K M + [S}).

    Nel punto in cui K M \u003d [S], questa equazione si riduce a V \u003d V max ÷ 2, quindi K M è uguale alla concentrazione del substrato quando la velocità è la metà del suo valore massimo. Ciò rende teoricamente possibile leggere K M fuori dal grafico.
    Il diagramma di Lineweaver-Burk

    Sebbene sia possibile leggere K M da un diagramma di Michaelis-Menten, non è ' t facile o necessariamente preciso. Un'alternativa è tracciare il reciproco dell'equazione di Michaelis-Menten, che è (dopo che tutti i termini sono stati riorganizzati):

    1 /V \u003d {K M /(V max × [ , 3, [[S])} + (1 /V max)

    Questa equazione ha la forma y \u003d mx + b, dove

  • y \u003d 1 /V

  • x \u003d 1 /S

  • m \u003d K M /V max

  • b \u003d 1 /[S]

  • x-interccept \u003d -1 /K M

    Questa è l'equazione che i biochimici normalmente usano per determinare K M. Preparano varie concentrazioni di substrato (poiché è una linea retta, tecnicamente ne servono solo due), tracciano i risultati e leggono K M direttamente dal grafico.

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