1. Ricombinazione:
* Le estremità del taglio di entrambe le molecole di DNA avranno estremità appiccicose complementari.
* Queste estremità appiccicose possono basare una coppia tra loro, permettendo ai frammenti di DNA batterica e umana di ricottura (unisciti insieme).
* Questo processo è chiamato ricombinazione .
* ligase L'enzima può quindi essere usato per unirsi permanentemente ai frammenti di DNA, creando una molecola ibrida contenente DNA batterico e umano.
2. Formazione di plasmidi ricombinanti:
* Se il DNA batterico è nella forma di un plasmide , Un pezzo circolare di DNA che si replica indipendentemente dal cromosoma batterico, la ricombinazione può verificarsi all'interno del plasmide.
* Ciò si traduce in un plasmide ricombinante trasportando un pezzo di DNA umano.
* Questi plasmidi possono quindi essere introdotti nelle cellule batteriche, consentendo la replicazione e l'espressione del gene umano all'interno dei batteri.
3. Conseguenze della ricombinazione:
* Questo processo è fondamentale per ingegneria genetica , permettendo agli scienziati di trasferire geni da un organismo a un altro.
* Ha molte applicazioni, tra cui:
* Produzione di proteine terapeutiche: I batteri possono essere usati per produrre grandi quantità di proteine umane, come l'insulina.
* Terapia genica: Il DNA ricombinante può essere usato per correggere i difetti genetici nell'uomo.
* Strumenti diagnostici: Il DNA ricombinante può essere utilizzato per creare sonde e kit per il rilevamento delle malattie.
4. Sfide:
* Non tutti gli enzimi di restrizione creano lo stesso tipo di estremità appiccicose. Se gli enzimi usati per tagliare il DNA batterico e umano producono estremità incompatibili, non si verificherà la ricombinazione.
* La dimensione e la complessità dei frammenti di DNA possono influenzare l'efficienza della ricombinazione.
* Esistono limitazioni sulla dimensione del frammento di DNA che possono essere inseriti in un plasmide.
In sintesi: La miscelazione del taglio del DNA batterico e umano con la stessa enzima di restrizione consente la ricombinazione, portando alla creazione di molecole ibride di DNA e plasmidi ricombinanti. Questo processo è cruciale per l'ingegneria genetica e ha varie applicazioni in biotecnologia e medicina.
