Le curve di calibrazione vengono utilizzate per determinare la concentrazione di sostanze sconosciute sulla base di precedenti misurazioni di soluzioni a concentrazioni note. La precisione e l'accuratezza delle misurazioni dipendono dalla curva di calibrazione. Migliore è la curva, più accurata è la risposta, peggiore è la curva, peggiore è la precisione. Questo è un tipo di metodo di confronto, lo sconosciuto è confrontato con un noto. Le curve di calibrazione sono utilizzate per tutti i tipi di misure che utilizzano molte macchine diverse. Questo esempio utilizza uno spettrofotometro.
Diluire la soluzione standard a diverse concentrazioni. È tipico fare una diluizione 10 volte, 20 volte la diluizione, 30 volte la diluizione o qualche altra soluzione graduale. Effettuare ciascuna diluizione due volte in modo che tutti i campioni siano in duplicato.
Calcolare le concentrazioni delle soluzioni diluite. Un esempio della nuova concentrazione per la diluizione 10 volte sarebbe la concentrazione della prima soluzione moltiplicata per 0,10.
Leggere l'assorbenza delle soluzioni diluite sullo spettrofotometro. Inserire una cuvetta nello spettrofotometro in modo che il segno del triangolo sia allineato con il percorso della luce. Chiudere il coperchio dello spettrofotometro e premere il pulsante zero. Azzerare la macchina con acqua distillata ogni cinque campioni. Una volta che la macchina è azzerata, leggere i campioni allo stesso modo. L'unica differenza è che premi Invio per ottenere l'assorbenza. Premere Invio dopo aver chiuso il coperchio. Registrare questi valori in un notebook.
Calcolare l'assorbenza rispetto alle concentrazioni note calcolate per tutti i campioni. La concentrazione nota sarà sull'asse X e l'assorbenza sull'asse Y. È meglio creare il grafico in un programma di grafica per computer.
Utilizzare il programma di rappresentazione grafica per calcolare la linea di regressione per i punti rappresentati graficamente. È possibile eliminare uno dei due punti per ogni diluizione per ottenere la migliore linea di regressione. Questo è il punto di fare ogni diluizione in duplicato. Più il valore R ^ 2 è vicino a uno, migliore è la linea di regressione. Prendi nota dell'equazione della linea di regressione.
Leggi l'assorbenza della soluzione di concentrazione sconosciuta sullo spettrofotometro. Registrare questa capacità di assorbimento.
Calcolare la concentrazione della soluzione sconosciuta utilizzando l'equazione della linea di regressione. L'assorbenza sconosciuta viene sostituita con Y nell'equazione. Stai risolvendo l'equazione per X, la concentrazione.
