Un regno precedentemente invisibile fu rivelato agli inizi del 1600 con la costruzione dei primi microscopi composti che portarono a importanti revisioni nella comprensione scientifica. I microscopi composti di base sono ora attrezzature standard in medicina e scienze naturali. La luce visibile trasmessa risplende attraverso i sottili preparati per l'ingrandimento. Microscopi elettronici a trasmissione e a scansione sviluppati dal 1931 in poi. Non usano la luce ottica, ma fasci di elettroni e campi magnetici per visualizzare i campioni. Principalmente per la ricerca istituzionale, la preparazione dei campioni richiede attrezzature complesse e costose.
Comprensione dei microscopi composti
Esistono diversi tipi specializzati di microscopi composti, ma i microscopi a campo chiaro sono più comuni. I campioni per loro dovrebbero essere solo diversi micron, che è un milionesimo di metro, spesso. Gli esemplari più spessi non lasciano passare abbastanza luce e non consentono una messa a fuoco precisa. I microscopi a campo chiaro hanno un tubo con lenti obiettivo in basso, più vicino al campione, e una lente oculare, o un oculare, nella parte superiore. Diverse lenti obiettivo di diversi ingrandimenti ruotano su un nasello, o torretta. Il palcoscenico appena sotto il portavaso tiene il vetrino del campione, e al di sotto di esso una fonte di luce risplende attraverso un condensatore al campione. I moderni microscopi composti possono ingrandire un oggetto da 1.000 a 2.000 volte le dimensioni originali.
Supporti interi
Per piccoli oggetti come peli, piccoli insetti, parti di insetti o grani di polline, il campione viene posizionato direttamente sulla parte centrale di un vetrino per microscopio in vetro o plastica con una piccola quantità di mezzo di montaggio, solitamente un prodotto di resina sintetica o naturale per vetrini permanenti. Per i vetrini temporanei, come una goccia di acqua del laghetto contenente microrganismi, l'acqua è il mezzo di montaggio. Proteggi i campioni con un vetrino coprioggetto, un pezzo di vetro o plastica molto sottile o quadrato. Alcuni campioni necessitano di colorazione con coloranti naturali o sintetici destinati alla microscopia per essere visti bene.
Zucche e macchie
Un modo semplice per preparare un campione sottile è quello di schiacciare o appiattire un piccolo pezzo di tessuto sotto il vetrino. Spesso utilizzati in campioni di piante per vedere i cromosomi, i tessuti in rapida crescita come le punte delle radici o le antere che si trovano in divisione cellulare sono conservati nel fissativo, quindi addolciti e colorati per rivelare i cromosomi. La delicata pressione dall'estremità della gomma di una matita centrata sul campione scivolato dalla copertura costringe le cellule a distanziarsi in un singolo strato. In strisci, il campione viene distribuito in modo sottile su una diapositiva utilizzando un altro vetrino come spalmatore e lo striscio risultante viene essiccato e colorato. In medicina, campioni di fluidi corporei, come sangue, liquido cerebro-spinale o seme vengono spalmati.
Sezioni del tessuto macchiato
Una procedura di sezionamento più complicata si verifica quando la struttura e l'organizzazione di un tutto piccolo organismo o un pezzo di tessuto ha bisogno di studio. Per la maggior parte dei campioni, prima il tessuto viene conservato e indurito e l'acqua rimossa. Quindi il campione viene incorporato in un supporto rigido come cera o plastica e tagliato in sezioni molto sottili con uno spessore di diversi micron utilizzando una macchina di precisione chiamata microtomo. Il campione è orientato per dare sezioni trasversali o sezioni longitudinali quando tagliate. Le sezioni sono incollate su vetrini da microscopio, il mezzo di inclusione rimosso e i tessuti macchiati per differenziare strutture e cellule. Dove la velocità è essenziale, come nelle biopsie chirurgiche per il cancro, i campioni vengono congelati, tagliati con un microtomo congelato, colorati e esaminati.