Analisi basata sulla fluorescenza di vescicole extracellulari mediante illuminazione e tracciamento sequenziali nel tempo. Credito:POSTECH
Basandosi sul principio di interazione tra materia e luce, è stato sviluppato un nuovo metodo per tracciare e osservare il moto browniano di molecole di dimensioni nanometriche in rapido movimento, e misurare i diversi segnali di fluorescenza di ciascuna nanoparticella biologica.
Il sistema di analisi del tracciamento delle nanoparticelle (NTA) è il metodo di quantificazione delle nanoparticelle più comunemente usato al mondo. È un metodo che osserva e traccia un gruppo di nanoparticelle in un'immagine catturata come una singola unità particellare. Recentemente, un team di ricerca POSTECH, guidato dal Dr. Siwoo Cho e dal Ph.D. candidato Johan Yi del Dipartimento di Ingegneria Meccanica, è riuscito a misurare l'importo, dimensione, e la luminosità della luce diffusa attraverso NTA e hanno ulteriormente misurato i diversi segnali di fluorescenza delle singole particelle.
Il team di ricerca ha sviluppato un sistema di analisi di tracciamento delle nanoparticelle (NTA) basato sulla fluorescenza per caratterizzare la dimensione e l'espressione proteica delle singole vescicole extracellulari (EV). In questo sistema, un foglio di laser con quattro diverse lunghezze d'onda è stato proiettato sui veicoli elettrici secondo un programma programmato, fornendo immagini scattering intercalate da tre immagini fluorescenti. La dimensione, rapporto, e la luce diffusa di migliaia di singole particelle sono state osservate, ed è stato ottenuto un valore sei dimensionale composto da tre diverse fluorescenza.
Utilizzando questo sistema NTA proposto, i ricercatori hanno misurato la distribuzione di proteine specifiche nei veicoli elettrici (ad es. esosomi), che sono nanoparticelle biologiche, a livello delle singole particelle e ha analizzato la relazione tra le proteine.
Questo sistema NTA consente all'utente di osservare le nanoparticelle durante l'analisi e ottenere dati quantitativi di singole o tutte le nanoparticelle immediatamente dopo aver caricato il campione senza la necessità di un gruppo di controllo. Consente ai ricercatori di osservare le cellule a livello molecolare per ottenere importanti indizi per comprendere i vari processi vitali.
Per esempio, poiché il sistema si rivolge a tutti i tipi di nanoparticelle, può essere utilizzato per il monitoraggio ambientale come polveri sottili, analisi di bio-nanoparticelle per ricerca e sviluppo di virus, e la diagnosi delle malattie e il biomonitoraggio attraverso l'analisi delle nanoparticelle di vari fluidi corporei.
"Il sistema NTA basato sulla fluorescenza multiplex sviluppato in questo studio consente agli scienziati di analizzare l'associazione tra diverse proteine negli esosomi, " ha spiegato il professor Jaesung Park di POSTECH. "Ci aspettiamo che contribuisca in modo significativo al progresso delle industrie e della ricerca relativa agli esosomi in futuro".