Un team congiunto dalla Cina ha recentemente fornito un sensibile, multiplexing, metodo di rilevazione quantitativa per la diagnosi precoce e la terapia mirata delle neoplasie mieloproliferative, un tipo di tumore ematologico cronico che è accompagnato da insufficienza midollare o leucemia.

Il gruppo, guidato da Zhou Lianqun dell'Istituto di ingegneria e tecnologia biomedica di Suzhou dell'Accademia cinese delle scienze e GUAN Ming dell'ospedale Huashan, ha stabilito una piattaforma di amplificazione isotermica mediata da loop digitale assistita da nanoparticelle (nano-dLAMP) per l'analisi delle neoplasie mieloproliferative.

Reazione a catena della polimerasi digitale (PCR digitale, dPCR), un'alta sensibilità, tecnologia di rilevamento degli acidi nucleici quantitativa assoluta e ad alta tolleranza, svolge un ruolo importante in una varietà di campi di applicazione, come il rilevamento di mutazioni rare, variazione del numero di copie, biopsia liquida, analisi di singole cellule, rilevamento geneticamente modificato, test della carica virale, e analisi microbiologica quantitativa.

In questo studio, i ricercatori hanno fabbricato chip di microarray con quattro partizioni fisiche per il rilevamento simultaneo di calreticulina di tipo 1, calreticulina di tipo 2, Janus chinasi 2 mutazioni V617F e un gene di riferimento interno.

Hanno quindi utilizzato additivi per PCR e nanoparticelle per rendere la tradizionale amplificazione isotermica mediata da loop (LAMP) adatta per l'amplificazione su scala nanometrica.

I risultati hanno suggerito che le nanoparticelle potrebbero migliorare le prestazioni di amplificazione di LAMP da nanolitri.

La rilevazione quantitativa dei principali marcatori molecolari delle neoplasie mieloproliferative potrebbe essere eseguita simultaneamente in un chip di microarray a quattro partizioni entro un'ora. L'accordo tra la piattaforma sviluppata e il commerciale Quantstudio 3D è stato elevato al 99%.

Questo preciso, rapido, multiplex, e la piattaforma nano-dLAMP economica potrebbe essere uno strumento promettente per la diagnosi clinica in futuro, secondo i ricercatori.

I risultati dello studio sono stati pubblicati su Sensors &Actuators B:Chemical dal titolo "Establishment of Scalable Nanoliter Digital LAMP Technology for the Quantitative Detection of Multiple Myeloproliferative neoplasm molecolare markers".

Il gruppo di Zhou si è concentrato sul campo dei biosensori per più di 10 anni, e ha accumulato una solida base nello sviluppo di metodi di biosensori, progettazione e lavorazione di biochip, e lo sviluppo di strumenti per le bioscienze.

Nella ricerca e sviluppo della PCR digitale, metodo dPCR basato su chip (cdPCR) con elevata stabilità di isolamento, è stata sviluppata una buona uniformità di temperatura e una rapida velocità di rilevamento. Sono stati ottenuti una serie di progressi sul metodo di rilevamento, patata fritta, reagente e strumento di cdPCR.