Il test Western blot, chiamato anche immunoblotting, è un test per una proteina specifica all'interno di una miscela di proteine. Il test Western blot viene eseguito dopo elettroforesi su gel o test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e utilizza anticorpi per identificare proteine ​​specifiche.

SDS-PAGE

Sodio dodecil solfato poliacrilammide elettroforesi su gel (SDS-PAGE) è un test comune utilizzato per separare le proteine ​​da utilizzare nel Western blot. Le proteine ​​sono separate dal peso e dalle proprietà elettriche mentre si muovono attraverso una matrice di gel.

ELISA

Il test ELISA utilizza enzimi o anticorpi attaccati a una superficie solida per creare la superficie di prova. Un campione viene quindi aggiunto alla superficie di prova. Gli anticorpi o gli enzimi che reagiscono o si attaccano alle proteine ​​indicano un risultato positivo.

Western Blot

Il test Western blot viene eseguito dopo l'elettroforesi su gel. Le proteine ​​separate vengono trasferite (o macchiate) su nitrocellulosa o membrane di nylon e identificate da anticorpi specifici che sono contrassegnati da una proteina secondaria.

Conferma del test positivo

Il test Western blot viene utilizzato per confermare risultati positivi da elettroforesi su gel o test ELISA. Il test Western blot può identificare le proteine ​​in modo più specifico e può escludere falsi positivi.

Malattie

Il test Western blot viene generalmente utilizzato per confermare risultati positivi del test per il virus dell'immunodeficienza umana (HIV) e Lyme la malattia.