HPLC offre un metodo rapido, automatizzato e altamente accurato per identificare determinati componenti chimici in un campione, ma può essere costoso, complesso e non funziona per tutti i campioni. I laboratori medici, forensi, ambientali e manifatturieri utilizzano la tecnica per quantificare e separare le sostanze chimiche in un campione. L'HPLC presenta sia vantaggi che svantaggi rispetto ad altre tecniche.

HPLC e tecniche simili

Come altre forme di cromatografia, l'HPLC consente la separazione di componenti chimici attraverso l'uso di una fase mobile e una stazionaria fase. La fase mobile è liquida e la fase stazionaria è solida. Poiché i diversi componenti si muovono a velocità diverse, si separano l'uno dall'altro. Le tecniche alternative includono l'elettroforesi capillare, dove le sostanze migrano attraverso soluzioni in un campo elettrico, e altri metodi cromatografici come l'estrazione in fase solida, la gas cromatografia e la cromatografia su strato sottile.

Velocità, efficienza e precisione

Rispetto ad altre tecniche cromatografiche, come TLC, HPLC è estremamente veloce ed efficiente. Utilizza una pompa, piuttosto che la gravità, per forzare un solvente liquido attraverso un materiale adsorbente solido, con diversi componenti chimici che si separano mentre si muovono a velocità diverse. Il processo può essere completato in circa 10 o 30 minuti e offre un'alta risoluzione. È accurato e altamente riproducibile. Poiché è ampiamente automatizzato, le esecuzioni HPLC di base possono essere eseguite con un addestramento minimo.

Costo e complessità

Nonostante i suoi vantaggi, l'HPLC può essere costoso, richiedendo grandi quantità di prodotti organici costosi. Tecniche come l'estrazione in fase solida e l'elettroforesi capillare possono essere più economiche e persino più veloci, soprattutto per l'analisi in buone pratiche di fabbricazione. Sebbene sia relativamente facile utilizzare i metodi HPLC esistenti, può essere complesso risolvere i problemi o sviluppare nuovi metodi. Ciò è dovuto in gran parte alla varietà di moduli, colonne e fasi mobili.

Sensibilità e risoluzione

In generale, HPLC è versatile ed estremamente preciso quando si tratta di identificare e quantificare i componenti chimici. Con molti passaggi coinvolti, la precisione dell'HPLC dipende in gran parte dal processo che è automatizzato e quindi altamente riproducibile. L'HPLC ha bassa sensibilità per alcuni composti e alcuni non possono essere rilevati poiché sono adsorbiti in modo irreversibile. Le sostanze volatili sono meglio separate dalla gascromatografia.