* Coomassie Brilliant Blue G-250 Dye: Il dosaggio utilizza questo colorante, che si lega alle proteine. Questo legame cambia la struttura del colorante e provoca uno spostamento nello spettro di assorbanza.
* Cambiamento del colore: Quando il colorante si lega alla proteina, cambia colore da marrone al blu. Questa forma blu ha una massima assorbanza a 595 nm.
* Quantificazione della proteina: L'intensità del colore blu è direttamente proporzionale alla quantità di proteina presente. Misurando l'assorbanza a 595 nm, possiamo quantificare la concentrazione di proteina.
In sintesi:
* Il dosaggio Bio-Rad utilizza il colorante G-250 Grilliant Bri Brilliant per legarsi alle proteine.
* Il colorante legato diventa blu e assorbe al massimo a 595 nm.
* L'assorbanza a 595 nm viene misurata per determinare la concentrazione di proteina.
Pertanto, mentre l'assorbanza viene misurata a 595 nm, non è la proteina totale che viene misurata direttamente, ma il cambiamento di colore causato dal legame del colorante alle proteine.
