* Il fieno: Il fieno contiene una varietà di microbi, tra cui batteri, funghi e protozoi, che vivono sopra e all'interno del materiale vegetale.
* The Pepper Corns: Pepper Corns ospita anche microbi, anche se in genere meno del fieno.
* L'acqua: L'acqua utilizzata per creare l'infusione può contenere microbi dalla sorgente, come l'acqua del rubinetto o l'acqua piovana.
* l'aria: Gli organismi microscopici sono presenti nell'aria e possono facilmente contaminare l'infusione.
Questi organismi vengono introdotti nell'infusione durante il processo di preparazione e quindi si moltiplicano rapidamente nell'ambiente ricco di nutrienti.
Il processo di osservazione di questi organismi nelle infusioni è stato determinante nello sviluppo della microbiologia. I primi scienziati come Antonie Van Leeuwenhoek hanno osservato questi "animali" attraverso i suoi microscopi e hanno fatto importanti scoperte sulla natura dei microbi.