1. Preparazione degli espianti:
* Selezione del materiale di origine: Il materiale vegetale sano e privo di malattie viene selezionato, di solito dal bocciolo apicale, dai segmenti dello stelo o dai tessuti fogliare.
* sterilizzazione: Il materiale scelto viene sterilizzato usando disinfettanti come candeggina o etanolo per eliminare eventuali microbi contaminanti.
2. Iniziazione culturale:
* Posizionamento degli espianti: L'espianto sterilizzato è posizionato su un terreno di coltura contenente nutrienti e ormoni specifici, come auxine e citochinine. Questo mezzo simula le condizioni necessarie per la crescita delle piante.
* Ambiente sterile: La cultura è mantenuta in un ambiente sterile, di solito all'interno di una camera di crescita o incubatrice, per prevenire la contaminazione.
3. Induzione e moltiplicazione del callo:
* Formazione del callo: L'espianto subisce una divisione cellulare, formando una massa di cellule indifferenziate note come callo. Questo è spesso indotto aggiungendo ormoni specifici al terreno di coltura.
* moltiplicazione del callo: Il callo è sub-coltura su media freschi per aumentare il suo volume.
4. Shoot Induzione:
* Shift ormonali: La concentrazione ormonale nel mezzo viene regolata per promuovere lo sviluppo delle riprese. Le citochinine sono in genere utilizzate per incoraggiare la formazione di riprese.
* Sviluppo delle riprese: I germogli si sviluppano dal callo, risultando in un gruppo di plantlet.
5. Induzione alla radice:
* Shift di ormone di nuovo: Il mezzo viene nuovamente regolato per indurre la formazione della radice. Questo di solito comporta l'aumento della concentrazione di auxine.
* Sviluppo delle radici: Le radici si sviluppano sui planimetrie, preparandole per il trapianto.
6. Acclimatizzazione e trapianto:
* Indurimento: I planimetri sono gradualmente acclimatati in condizioni ambientali esterne, come la luce solare, l'umidità e la temperatura, trasferendole in una serra o una camera di crescita con crescente esposizione a questi fattori.
* Trapianto: Una volta che le planimetrie sono sufficientemente indurite, vengono trapiantate nel suolo o in altri mezzi di crescita.
Vantaggi delle piante coltivate clonazioni nella coltura tissutale:
* Moltiplicazione rapida: Un gran numero di piante identiche può essere prodotta rapidamente da un singolo espianto, consentendo una propagazione efficiente.
* Piante prive di malattie: Il processo elimina le malattie virali e altre malattie presenti nel materiale vegetale originale.
* Uniformità genetica: Tutte le piante clonate sono geneticamente identiche, portando a coerenti caratteristiche delle piante.
* Preservazione di specie rare: Questo metodo può essere usato per preservare e propagare specie vegetali in via di estinzione o rare.
Limitazioni:
* Costo e competenza: La cultura dei tessuti richiede attrezzature specializzate, strutture sterili e personale addestrato, rendendolo un processo costoso.
* Variazione genetica: I cloni sono geneticamente identici, limitando la loro adattabilità a diverse condizioni ambientali.
* Embriogenesi somatica: In alcuni casi, il processo può portare alla formazione di embrioni somatici, che potrebbero non svilupparsi in piante normali.
