Ecco una ripartizione:
1. Preparazione: Le cellule batteriche vengono trattate con una soluzione che rende le loro pareti cellulari più permeabili. Questo viene spesso fatto con cloruro di calcio, che aiuta il DNA a entrare nella cellula.
2. Introduzione: Il DNA plasmidico ricombinante viene quindi aggiunto alle cellule batteriche preparate. Il DNA plasmidico può essere introdotto utilizzando diversi metodi, tra cui:
* Shock termico: Le cellule e il DNA plasmidico vengono miscelati e poi sottoposti ad un breve shock termico, che aiuta il DNA ad entrare nelle cellule.
* Elettroporazione: Alle cellule viene applicato un breve impulso elettrico che crea pori temporanei nella membrana cellulare permettendo al plasmide di entrare.
3. Trasformazione: Una volta che il plasmide si trova all'interno della cellula, i batteri possono assorbire il DNA e incorporarlo nel proprio genoma. Questo processo è chiamato trasformazione.
4. Selezione: I batteri trasformati vengono quindi selezionati per utilizzare una tecnica chiamata selezione antibiotica. I plasmidi contengono tipicamente un gene di resistenza agli antibiotici, quindi solo i batteri che hanno assorbito il plasmide saranno in grado di crescere su un terreno contenente l'antibiotico.
Questo processo consente ai ricercatori di introdurre geni specifici nei batteri, consentendo loro di produrre proteine o composti desiderati, tra le altre applicazioni.
