FerriTagging di una proteina chiamata HIP1R in fossette rivestite di clatrina. La codifica di HIP1R può essere tracciata mediante microscopia ottica e microscopia elettronica. La posizione della ferritina è indicata da punti rossi nella fossa. Credito:Università di Warwick
Gli scienziati dell'Università di Warwick hanno creato un nuovo modo di visualizzare le proteine che si trovano all'interno delle cellule umane.
Usando la ferritina, un grande guscio proteico che le nostre cellule usano per immagazzinare il ferro, i ricercatori hanno trovato un metodo che hanno chiamato FerriTag che consente a un microscopio elettronico (EM) di visualizzare le proteine proprio a differenza dei metodi attuali. Il metodo ha permesso agli scienziati di consentire alla cellula di realizzare il tag stesso evitando i danni causati dal posizionamento dall'esterno della cellula.
Il loro articolo FerriTag è un nuovo tag inducibile geneticamente codificato per la microscopia elettronica a luce correlativa è pubblicato sulla rivista Comunicazioni sulla natura .
Il team ha deciso di localizzare con precisione una proteina che si trova nelle fosse ricoperte di clatrina. Questi sono punti di ingresso larghi 100 nm utilizzati dai virus per invadere le cellule e infettarle. Utilizzando FerriTag, il team è stato in grado di vedere dove si trova la proteina nella fossa e sulla faccia interna della superficie della cellula.
Il team è stato guidato dal Dr. Stephen Royle Professore Associato e Senior Cancer Research UK Fellow presso la Warwick Medical School. Ha detto:"Le proteine fanno quasi tutti i lavori nelle cellule che gli scienziati vogliono studiare. Possiamo imparare molto su come funzionano le proteine semplicemente osservandole al microscopio. Ma dobbiamo conoscere la loro posizione precisa".
Sebbene la microscopia ottica possa essere utilizzata per visualizzare il movimento delle proteine, la risoluzione è bassa, quindi vedere la posizione precisa di una proteina è impossibile. Questo può essere superato utilizzando la microscopia elettronica che fornisce una risoluzione più elevata.
Per consentire alle proteine di essere visualizzate da entrambi i microscopi e di correlarle, il team di ricerca ha sviluppato un metodo per etichettare le proteine in modo che possano essere viste da entrambi i tipi di apparecchiature.
Il tagging è ampiamente utilizzato e sono disponibili diversi tag che presentano tuttavia degli inconvenienti accertati; alcuni non sono abbastanza precisi, oppure non funzionano su singole proteine. Per superare questo, il laboratorio del Dr. Royle ha creato un nuovo tag e lo ha fuso con una proteina fluorescente. Il team del Dr. Royle ha chiamato la nuova tecnica FerriTag perché si basa sulla ferritina che può essere visualizzata da un microscopio elettronico perché il ferro disperde gli elettroni.
Il dottor Royle ha detto che il suo laboratorio ha dovuto superare un altro ostacolo:"Quando la ferritina si fonde con una proteina, finiamo con una poltiglia. Così, abbiamo alterato la ferritina in modo che potesse essere attaccata alla proteina di interesse usando un farmaco.
"Ciò significava che potevamo mettere il FerriTag sulla proteina che volevamo visualizzare in pochi secondi.
"La cosa bella di FerriTag è che è codificato geneticamente. Ciò significa che otteniamo la cellula per creare il tag stesso e non dobbiamo inserirlo dall'esterno che danneggerebbe la cellula".