1. Cromatografia di adsorbimento:
* Principio: Questo metodo si basa sulle diverse affinità dei componenti per la fase stazionaria (di solito un solido adsorbente come il gel di silice o l'allumina). I componenti che si legano più fortemente alla fase stazionaria si muovono più lentamente attraverso la colonna.
* Esempi:
* Cromatografia a colonna: Una colonna verticale piena della fase stazionaria. La miscela viene applicata nella parte superiore e la fase mobile (liquido o gas) scorre attraverso, separando i componenti.
* Cromatografia a strato sottile (TLC): Un sottile strato di adsorbente è rivestito su una piastra. La miscela viene individuata nella parte inferiore e la fase mobile si sposta la piastra mediante azione capillare, separando i componenti.
2. Cromatografia di partizione:
* Principio: Questo metodo sfrutta le diverse solubilità dei componenti in due fasi impossibili (la fase stazionaria e la fase mobile). I componenti più solubili nella fase stazionaria si muoveranno più lentamente.
* Esempi:
* gascromatografia (GC): La fase stazionaria è un liquido non volatile rivestito su un supporto solido e la fase mobile è un gas inerte. Questo è usato per separare i composti volatili.
* Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC): Utilizza una pompa ad alta pressione per forzare la fase mobile attraverso una colonna imballata contenente la fase stazionaria (di solito un liquido). Ciò è adatto per separare una vasta gamma di composti.
3. Cromatografia a scambio ionico:
* Principio: Questo metodo utilizza gruppi funzionali caricati nella fase stazionaria per legare gli ioni della carica opposta dalla miscela. Ioni diverse con affinità diverse per la fase stazionaria sono separati.
* Esempi:
* Cromatografia di scambio cationico: Utilizza una fase stazionaria caricata negativamente per legare i cationi.
* Cromatografia di scambio anionico: Utilizza una fase stazionaria caricata positivamente per legare gli anioni.
4. Cromatografia ad esclusione dimensionale (sec):
* Principio: Questo metodo separa molecole in base alle loro dimensioni. La fase stazionaria ha pori di dimensioni specifiche. Le molecole più grandi non possono entrare nei pori e passare attraverso la colonna più velocemente, mentre molecole più piccole possono entrare nei pori e spostarsi più lentamente.
* Esempi:
* Cromatografia di filtrazione in gel: Utilizza una matrice in gel come fase stazionaria.
* Cromatografia per permeazione gel (GPC): Usa un polimero poroso come fase stazionaria.
5. Cromatografia di affinità:
* Principio: Questo metodo utilizza un'interazione altamente specifica tra un componente nella miscela e un ligando immobilizzato nella fase stazionaria. Ciò consente una separazione altamente selettiva.
* Esempi:
* Cromatografia immunoaffinità: Usa gli anticorpi come ligandi per legare e separare proteine specifiche.
* Cromatografia di affinità metallica: Utilizza ioni metallici come ligandi per legare e separare le proteine con specifici siti di legame metallico.
Nota: La scelta specifica del metodo cromatografico dipende dalla natura della miscela, dalla separazione desiderata e dalle proprietà dei composti. Ogni metodo ha i suoi vantaggi e svantaggi e la scelta spesso richiede un'attenta considerazione.
