2+ ) sono non Utilizzato per indurre competenza artificiale nei batteri. Invece, cloruro di calcio (CACL ₂ ) viene utilizzato.

Ecco perché:

* Facilitare l'assorbimento del DNA: CACL 2 Il trattamento rende le cellule batteriche più permeabili al DNA, consentendo loro di assumere il DNA esogeno in modo più efficiente. Il meccanismo prevede:

* destabilizzazione della membrana cellulare: CA 2+ Gli ioni interagiscono con i gruppi di testa fosfolipidica caricati negativamente della membrana cellulare, causando una leggera destabilizzazione. Questo rende la membrana più "che perde" e consente al DNA di entrare.

* schermatura del DNA: Il CA

2+ caricato positivamente Gli ioni neutralizzano le cariche negative sul DNA, impedendo che vengano respinti dalla membrana cellulare caricata negativamente.

* Facilitare il legame del DNA: CACL 2 Il trattamento può anche promuovere il legame del DNA alla superficie delle cellule batteriche, facilitando l'assorbimento.

* Shock termico: Dopo CACL ₂ Trattamento, i batteri sono sottoposti a un breve shock termico (in genere 42 ° C per 1-2 minuti). Questo shock termico interrompe ulteriormente la membrana cellulare e consente al DNA di entrare nella cellula.

Perché non ioni di calcio da soli?

Mentre gli ioni di calcio svolgono un ruolo nel meccanismo, usarli da soli non sarebbe efficace. Il cloruro di calcio fornisce la concentrazione necessaria di ioni di calcio e aiuta anche a mantenere l'equilibrio osmotico della cellula.

In sintesi:

Il cloruro di calcio viene utilizzato per la competenza artificiale nei batteri perché facilita l'assorbimento del DNA destabilizzando la membrana cellulare, proteggendo il DNA dalla repulsione e promuovendo il legame del DNA. Il passo di shock termico migliora ulteriormente l'ingresso del DNA.