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Aggiornato il 30 agosto 2022
Padroneggiare l'arte della diluizione è essenziale per chiunque lavori nel campo della chimica o della microbiologia. Diluizioni accurate migliorano la precisione del laboratorio, riducono la variabilità e, in definitiva, portano a dati più affidabili. La seguente guida passo passo si basa sulle migliori pratiche di laboratorio e sugli standard di sicurezza, garantendoti di eseguire ogni diluizione con sicurezza e precisione.
Per diluizioni chimiche o analitiche, utilizzare vetreria volumetrica come una pipetta volumetrica e un matraccio tarato. In microbiologia, le pipette sierologiche e i cilindri graduati sono adatti per trasferire piccoli volumi mantenendo la contabilità della soluzione.
Inizia con una soluzione madre liquida:un campione liquido puro o una soluzione preparata da una polvere o un liquido diluito a una concentrazione nota.
Misurare il volume esatto del brodo utilizzando una pipetta tarata e trasferirlo in un matraccio tarato che contenga il volume finale desiderato. Per una diluizione 1:100, pipettare 1,0 ml di brodo in un matraccio da 100 ml e aggiungere 99 ml di diluente per raggiungere un totale di 100 ml.
Trasferire la soluzione madre con una pipetta sierologica in un becher, quindi aggiungere il diluente utilizzando un cilindro graduato. Per una diluizione 1:100, aggiungere 1 ml di brodo a 100 ml di diluente, ottenendo un volume finale di 101 ml.
Utilizza il diluente specificato per il tuo metodo. In microbiologia, le scelte comuni includono terreni, tamponi e acqua sterile. In chimica, i diluenti possono essere solventi, acidi, basi o acqua deionizzata, a seconda dell'analita.
Agitare il pallone a metà dell'aggiunta del diluente per garantire l'omogeneità, quindi continuare ad aggiungere fino al raggiungimento del volume finale.
Per gli ultimi millilitri, utilizzare un contagocce per aggiungere il diluente in singole gocce, assicurandosi che il volume finale sia misurato accuratamente.
Tieni la beuta o il bicchiere all'altezza degli occhi e leggi il bordo inferiore del menisco, la curva concava formata dalla superficie del liquido. Allinea questo punto con la scala sul contenitore per una misurazione precisa.
Inserisci un'ancoretta magnetica nella diluizione e posiziona il contenitore su una piastra di agitazione oppure, se una piastra di agitazione non è disponibile, ferma la beuta, agitala e capovolgila ripetutamente per mescolare.
Quando è richiesto un volume finale elevato, eseguire diluizioni seriali. Per una diluizione 1:10.000, effettuare prima una diluizione 1:100 (1 ml di brodo in 100 ml di diluente). Trasferire quindi 1 ml di questa soluzione intermedia in altri 100 ml di diluente. L'effetto cumulativo produce una diluizione 1:10.000.
Aggiungere sempre l'acido all'acqua, non il contrario, per evitare reazioni esotermiche. Iniziare aggiungendo un piccolo volume d'acqua nel pallone prima di introdurre l'acido, quindi diluire al volume richiesto.
Etichettare chiaramente le diluizioni, evitare di sostituire il liquido perso durante la miscelazione e aggiungere sempre acido all'acqua per garantire sicurezza e precisione.
L'aggiunta di acqua all'acido può produrre reazioni violente e lesioni gravi. Utilizzare un bulbo per pipetta, non usare mai la pipetta con la bocca e aggiungere sempre l'acido all'acqua.
