Ecco un approccio generale al calcolo dei risultati del dosaggio:
1. Comprendi il principio del dosaggio: Sapere come funziona il dosaggio (ad es. Colorimetrico, enzimatico, immunochimico) e ciò che misura (ad es. Concentrazione, attività, affinità di legame).
2. Determina la curva standard: Questo è un grafico che mette in relazione il segnale del dosaggio (ad es. Assorbanza, fluorescenza) a concentrazioni note dell'analita.
3. Ottieni il segnale dal campione: Questa è la misurazione dal tuo campione sconosciuto.
4. Usa la curva standard per trovare la concentrazione corrispondente: Individua il segnale dal campione sulla curva standard e leggi la concentrazione corrispondente.
Ecco alcuni esempi di calcoli del dosaggio comuni:
1. Dosaggio colorimetrico:
* Formula: Concentrazione =(assorbanza del campione - assorbimento in bianco) / (pendenza della curva standard)
* Esempio: Se l'assorbanza del campione è 0,5, l'assorbanza in bianco è 0,1 e la pendenza della curva standard è 0,02, la concentrazione è (0,5 - 0,1) / 0,02 =20 unità.
2. Attività enzimatica:
* Formula: Attività =(ΔAbsorbance / Δtime) x (1 / ε x l x v)
* Dove:
* Δabsorbance è la variazione di assorbanza nel tempo
* Δtime è l'intervallo di tempo su cui è stato misurato il cambiamento di assorbanza
* ε è il coefficiente di estinzione molare del prodotto
* l è la lunghezza del percorso della cuvetta
* V è il volume della miscela di reazione
3. Assay ELISA:
* Formula: Concentrazione =(OD del campione - OD di vuoto) / (pendenza della curva standard)
* Nota: I test ELISA utilizzano spesso una "curva standard" generata da concentrazioni note dell'analita target.
Considerazioni importanti:
* unità: Assicurarsi che le unità per la concentrazione siano coerenti con il tipo di dosaggio.
* Calibrazione: Calibrare correttamente lo strumento utilizzato per il test.
* Controlli: Utilizzare controlli appropriati (ad es. Positivo, negativo, vuoto) per garantire che il dosaggio funzioni correttamente.
* Convalida del dosaggio: Prima di utilizzare un test, è essenziale convalidarlo per garantire l'accuratezza e la precisione.
Per calcoli specifici del dosaggio, dovrai consultare le istruzioni del produttore o un protocollo dettagliato.
