Ecco una rottura semplificata:
1. Denaturazione: Il campione di DNA viene riscaldato per separare la doppia elica in due singoli fili.
2. Ricottura: La temperatura viene ridotta, consentendo sequenze di DNA a singolo filamento, chiamate primer per legarsi a regioni specifiche sui fili del DNA del modello. Questi primer fungono da punti di partenza per la sintesi del DNA.
3. Estensione: La temperatura viene nuovamente sollevata, consentendo a un enzima di DNA polimerasi di attaccarsi ai primer e costruire nuovi fili di DNA complementari ai fili del modello. Questo processo utilizza nucleotidi liberi nella soluzione.
Questo ciclo di denaturazione, ricottura ed estensione viene ripetuto più volte, amplificando esponenzialmente il segmento DNA mirato.
Caratteristiche chiave di PCR:
* Specificità: I primer sono progettati per colpire sequenze di DNA specifiche, consentendo l'amplificazione del solo segmento desiderato.
* Sensibilità: La PCR può amplificare anche quantità minuscole di DNA.
* Versatilità: La PCR ha numerose applicazioni in vari campi, tra cui:
* Test genetici e diagnostica: Rilevare mutazioni o malattie.
* Scienza forense: Identificare gli individui dai campioni di DNA.
* Ricerca: Studio di espressione genica, clonazione di DNA e genomi di sequenziamento.
* Biotecnologia: Sviluppare nuovi farmaci e terapie.
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