1. Cultura cellulare:
* Scopo: Questo è il metodo più comune per i virus in crescita. Implica la coltivazione di cellule sensibili in un ambiente di laboratorio e quindi l'introduzione del virus.
* processo:
* Selezione della linea cellulare: La linea cellulare appropriata viene scelta in base al tropismo del virus (preferenza per infettare specifici tipi di cellule). Esempi includono Vero Cells (Monkey Reney), HEK293 (rene embrionale umano) e MDCK (rene canino).
* Crescita cellulare: Le cellule scelte vengono coltivate in un terreno di coltura contenente nutrienti e fattori di crescita.
* Inoculazione del virus: Il virus viene aggiunto alla coltura cellulare, permettendolo di infettare e moltiplicare all'interno delle cellule.
* Monitoraggio: La coltura è osservata per segni di infezione virale, come gli effetti citopatici (cambiamenti nella morfologia cellulare) o la produzione di nuove particelle virali.
* raccolta: Una volta che il virus ha raggiunto un titolo elevato (concentrazione), può essere raccolto dalla coltura cellulare per ulteriori studi o uso.
* Tipi:
* Cultura monostrato: Le cellule formano un singolo strato sul fondo di un piatto di coltura.
* Cultura di sospensione: Le cellule vengono coltivate in un mezzo liquido e continuamente agitate.
2. Embrionate uova:
* Scopo: Questo metodo è usato principalmente per coltivare l'influenza e alcuni altri virus.
* processo:
* Preparazione delle uova: Le uova di gallina fecondate sono incubate per periodi specifici per consentire lo sviluppo dell'embrione.
* Inoculazione del virus: Il virus viene iniettato nell'uovo attraverso il guscio, prendendo di mira membrane o fluidi specifici all'interno dell'embrione.
* Incubazione: Le uova inoculate sono incubate per un'ulteriore replicazione virale.
* raccolta: I fluidi infetti (ad es. Fluido allantoico) vengono raccolti e utilizzati per ulteriori studi o produzione di vaccini.
3. Sistemi in vivo:
* Scopo: Sebbene meno comuni per la cultura di laboratorio, alcuni virus possono essere coltivati in animali viventi, che fornisce un ambiente più complesso che imita il loro ciclo di infezione naturale.
* processo:
* Selezione degli animali: Gli animali scelti dipendono dalla gamma ospite del virus (ad es. Topi per l'influenza, scimmie per l'HIV).
* Inoculazione: Il virus viene introdotto nell'animale attraverso vari percorsi, come l'iniezione o l'inalazione.
* Monitoraggio: L'animale è monitorato per i segni di infezione.
* Collezione di tessuti: Dopo che il virus si è replicato, i tessuti vengono raccolti e analizzati per la crescita virale.
* Considerazioni etiche: L'uso di animali solleva preoccupazioni etiche ed è soggetto a regolamenti rigorosi.
4. Cultura di batteriofagi:
* Scopo: I batteriofagi (virus che infettano i batteri) sono coltivati usando colture batteriche.
* processo:
* Crescita batterica: L'ospite batterico scelto viene coltivata in un mezzo di brodo adatto.
* Infezione da fagi: Il batteriofago viene aggiunto alla coltura batterica.
* Replica: Il fagi infetta e si replica all'interno dei batteri.
* raccolta: Il brodo contenente fagi viene raccolto per ulteriori studi o applicazioni.
Considerazioni importanti:
* Sicurezza: I virus per la coltura richiedono rigorose procedure di sicurezza per prevenire il rilascio e l'infezione accidentali.
* Sterilità: Le tecniche sterili sono essenziali per evitare la contaminazione delle culture.
* Controllo di qualità: Vengono eseguiti controlli regolari per garantire la purezza e la vitalità delle colture di virus.
Questi metodi sono cruciali per la ricerca, lo sviluppo del vaccino, i test diagnostici e la comprensione della biologia dei virus.
