Mentre altri, come Francesco Redi e Lazzaro Spallanzani, avevano condotto esperimenti che sfidavano la teoria, il lavoro di Pasteur era cruciale nel fornire prove definitive contro di essa. Ha usato il suo famoso esperimento di palloni da scollo per cigno per dimostrare che i microrganismi crescono solo nel brodo solo quando esposti all'aria, non spontaneamente all'interno del brodo stesso. Questo esperimento ha dimostrato efficacemente che la vita deriva solo dalla vita preesistente, non dalla materia non vivente.
