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  • Guida passo passo per identificare batteri sconosciuti in laboratorio

    Quando si incontra un isolato batterico non caratterizzato, un approccio sistematico che combini microscopia, coltura e metodi molecolari è essenziale per un'identificazione accurata.

    1. Osserva i tratti fisici

    Inizia esaminando la composizione, la forma e il modo in cui le cellule si collegano tra loro dopo la divisione. Questi attributi di base forniscono i primi indizi sulla tassonomia dell'organismo.

    2. Applicare la colorazione di Gram

    La colorazione di Gram distingue i batteri con pareti spesse di peptidoglicano (Gram‑positivi) da quelli con pareti sottili o assenti (Gram‑negativi). È la pietra angolare della classificazione batterica.

    3. Esamina la morfologia

    • Cocci – cellule sferiche.
    • Bacilli – aste dritte.
    • Coccobacilli – aste corte e ovali.
    • Spirilla – rigido, a forma di spirale; sempre Gram‑negativi.
    • Spirochete – spirali flessibili e mobili; solitamente Gram‑neutro.
    • Vibrioni – a forma di virgola; Gram-negativi.

    Si noti che ciascuna forma può essere Gram‑positiva o Gram‑negativa, tranne la spirilla che è esclusivamente Gram‑negativa.

    4. Valutare i modelli di collegamento delle celle

    Dopo la divisione, cocchi e bacilli formano disposizioni caratteristiche:

    • Diplococchi/Diplobacilli – coppie.
    • Streptococchi/streptobacilli – catene.
    • Tetrade – quadrati di quattro cocchi.
    • Sarcinae – cubetti di otto cocchi.
    • Stafilococchi – grappoli a forma di uva.

    5. Cultura sui media selettivi

    Inoculare l'isolato su una gamma di terreni di crescita che favoriscono o inibiscono specifici gruppi batterici. Osserva la morfologia, il colore e il tasso di crescita delle colonie per restringere le possibilità.

    6. Eseguire test biochimici

    Esaminare i sottoprodotti metabolici (ad esempio ossidasi, catalasi, fermentazione dei carboidrati) per perfezionare ulteriormente l'identificazione. Molti laboratori utilizzano pannelli automatizzati per garantire velocità e precisione.

    7. Confermare con il sequenziamento del DNA

    Se i dati morfologici e biochimici non sono conclusivi, il sequenziamento dell'rRNA 16S o l'analisi dell'intero genoma possono abbinare definitivamente l'isolato a una specie conosciuta o rivelare un nuovo ceppo, a condizione che esistano genomi di riferimento.

    Ad esempio, un isolato Gram-negativo, aerobico e che forma catene di bastoncelli diritti potrebbe essere identificato come Escherichia coli dopo la conferma della coltura e del sequenziamento.

    Sergej Nazarov/iStock/GettyImages

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