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    Nuovo metodo di screening ad alta produttività sviluppato per i chetoni

    Diagramma di flusso dello screening della fluorescenza PMA-chetone. Credito:gruppo del Prof. SUN Zhoutong

    I chetoni sono di grande importanza come elementi costitutivi nella chimica organica sintetica e nella biocatalisi. La maggior parte dei chetoni non può essere facilmente analizzata quantitativamente a causa della mancanza di proprietà fotometriche visibili. Pertanto, per la determinazione dei chetoni è necessario un efficace sviluppo di test ad alta processività (HTA).

    Il gruppo del prof. Sun Zhoutong dell'Istituto di biologia industriale di Tianjin dell'Accademia cinese delle scienze ha sviluppato un metodo colorimetrico per rilevare rapidamente chetoni strutturalmente diversi utilizzando la parametossi-2-ammino benzamidossima (PMA) come sonda chimica.

    Il sistema basato su PMA consente uno screening della fluorescenza abbastanza sensibile (fino a μM di gamma), compatibile con sistemi acquosi e ampio range di pH. Si possono usare vari chetoni, specialmente quelli con sostituenti ricchi di elettroni e stericamente piccoli. Il test di facile utilizzo può essere condotto in un formato di piastra da 96 pozzetti a temperatura ambiente con le normali apparecchiature di laboratorio.

    Per di più, il saggio ad alta processività (HTA) sviluppato è stato impiegato con successo nella scoperta basata sull'estrazione di enzimi con maggiore attività di ossidazione verso alcoli secondari e nell'evoluzione diretta di un'alcol deidrogenasi finalizzata a migliorare l'attività catalitica utilizzando chetoni come substrati o prodotti.

    Questo lavoro fornisce uno strumento generale per il rilevamento dei chetoni nello sviluppo di biocatalizzatori.

    Lo studio, intitolato "Un saggio di fluorescenza ad alto rendimento per il rilevamento dei chetoni e le sue applicazioni nell'estrazione di enzimi e nell'ingegneria delle proteine, " è stato pubblicato in ACS Omega .


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