Il test di sensibilità antimicrobica, noto anche come test di sensibilità agli antibiotici, è una procedura di laboratorio utilizzata per determinare l’efficacia degli agenti antimicrobici contro specifici microrganismi. Questa procedura è fondamentale per guidare la scelta appropriata degli antibiotici nel trattamento delle infezioni. Sebbene esistano vari metodi per condurre test di sensibilità antimicrobica, una tecnica popolare nota per la sua semplicità e i risultati rapidi è il metodo di diffusione del disco Kirby-Bauer. Questo metodo prevede il test degli isolati batterici contro diversi agenti antimicrobici posizionando dischi impregnati di antibiotico su una piastra di agar contenente la coltura batterica. I seguenti passaggi forniscono una panoramica concisa del metodo di diffusione del disco Kirby-Bauer:

Preparazione dell'inoculo:

1. Far crescere l'isolato batterico in un terreno di coltura in brodo adatto per un tempo specificato per ottenere un inoculo standardizzato.

2. Regolare la torbidità del brodo di coltura in modo che corrisponda a uno standard predefinito, garantendo una densità costante di cellule batteriche.

Inoculo della piastra di agar:

1. Utilizzando un tampone sterile, distribuire uniformemente l'inoculo standardizzato sulla superficie di una piastra di agar contenente un terreno di crescita adatto.

Applicazione dei dischetti antibiotici:

1. Selezionare i dischi antibiotici appropriati in base agli agenti antimicrobici da testare.

2. Utilizzando una pinza sterile, posizionare con attenzione i dischi antibiotici sulla piastra di agar inoculata.

3. Assicurarsi che i dischi siano equidistanti e non si tocchino tra loro o con i bordi della piastra.

Incubazione della piastra:

1. Capovolgere la piastra di agar e incubarla alla temperatura e alle condizioni adeguate richieste per la crescita dell'isolato batterico. Ciò comporta in genere l'incubazione notturna.

Misurazione e interpretazione dei risultati:

1. Dopo il periodo di incubazione, esaminare la piastra di agar per individuare zone di inibizione attorno ai dischi antibiotici.

2. Le zone di inibizione rappresentano aree in cui la crescita batterica è inibita a causa dell'attività antimicrobica dell'antibiotico.

3. Misurare i diametri delle zone di inibizione utilizzando un righello o uno strumento standardizzato.

4. Fare riferimento a criteri interpretativi o linee guida stabiliti (come quelli forniti da CLSI o EUCAST) per determinare la sensibilità o la resistenza dell'isolato batterico a ciascun antibiotico in base ai diametri delle zone.

Riportare i risultati:

1. Riassumere i risultati classificando l'isolato batterico come suscettibile (S), intermedio (I) o resistente (R) a ciascun antibiotico in base ai criteri interpretativi.

2. Fornire il profilo di sensibilità dell'isolato batterico, che mostra il modello di sensibilità o resistenza agli antibiotici testati.

Applicazioni e vantaggi:

1. Il metodo di diffusione su disco Kirby-Bauer offre un mezzo semplice ed economico per valutare la sensibilità antimicrobica in contesti clinici.

2. Consente ai medici di prendere decisioni informate riguardo alla selezione degli antibiotici, ottimizzando le strategie di trattamento e riducendo al minimo il rischio di sviluppo di resistenza antimicrobica.

Nonostante la sua semplicità, il metodo di diffusione del disco Kirby-Bauer presenta alcune limitazioni ed eccezioni ed è importante seguire protocolli standardizzati e consultare linee guida e risorse aggiuntive per un'interpretazione e un reporting accurati dei risultati.