1. Tris(idrossimetil)amminometano (base Tris)
2. Acqua deionizzata
3. pHmetro o strisce indicatrici di pH
4. Bilancio analitico
5. Matraccio tarato (50 ml)
Procedura:
1. Pesare 0,6057 grammi di Tris base utilizzando una bilancia analitica.
Questo calcolo può essere effettuato utilizzando la formula:
Massa di Tris base (g) =Concentrazione (mM) x Volume della soluzione (L) x Peso molecolare di Tris base (g/mol)
In questo caso:
Massa di Tris base (g) =20 mM x 0,050 L x 121,14 g/mol =0,6057 g
2. Trasferire la base Tris pesata in un matraccio tarato da 50 mL.
3. Aggiungere una piccola quantità di acqua deionizzata (circa 30-40 ml) per sciogliere la base Tris.
4. Agitare delicatamente la fiaschetta per mescolare e sciogliere completamente la base Tris.
5. Controllare il pH della soluzione utilizzando un pHmetro o strisce indicatrici di pH. Il pH di una soluzione base Tris da 20 mM dovrebbe essere circa 8,0-8,5.
6. Se necessario, regolare il pH della soluzione aggiungendo piccole quantità di acido cloridrico (HCl) o idrossido di sodio (NaOH).
Nota:la base Tris è una base debole, quindi si dissolve facilmente in acqua. Tuttavia, se osservi particelle non disciolte, puoi riscaldare delicatamente la soluzione per aiutarle a dissolversi.
6. Una volta regolato il pH e ben miscelata la soluzione, aggiungere altra acqua deionizzata per portare il volume finale a 50 mL.
7. Mescolare accuratamente agitando delicatamente la beuta.
La tua soluzione base Tris da 20 mM è ora pronta per l'uso. Conservare la soluzione a temperatura ambiente o refrigerare se lo si desidera.
