Perché un buffer è essenziale:
* Conducibilità: Il tampone fornisce una soluzione elettrolitica, che consente a una corrente elettrica di fluire attraverso il gel durante l'elettroforesi. Questa corrente è ciò che guida il movimento delle molecole cariche (DNA, RNA o proteine) attraverso la matrice del gel.
* stabilità del pH: I tamponi mantengono un intervallo di pH specifico, che è cruciale per il corretto funzionamento degli enzimi utilizzati nell'elettroforesi (se applicabile) e garantisce che le molecole separate siano stabili.
* Concentrazione ionica: La soluzione tampone aiuta a mantenere una forza ionica coerente in tutto il gel. Ciò è importante per prevenire artefatti che potrebbero derivare dalla migrazione irregolare delle molecole a causa di variazioni della concentrazione di ioni.
soluzioni tampone comuni utilizzate in elettroforesi:
* Tris-Borate-EDTA (TBE) Buffer: Una scelta popolare per l'elettroforesi del DNA.
* Tris-acetato-EDTA (TAE) tampone: Utilizzato anche per l'elettroforesi del DNA, in particolare per frammenti di DNA più grandi.
* tampone tris-glicina: Spesso utilizzato per l'elettroforesi proteica.
In sintesi, la soluzione buffer:
* Consente alla corrente elettrica di fluire.
* Mantiene un pH stabile.
* Garantisce una forza ionica costante.
Fammi sapere se hai altre domande sulle tecniche di elettroforesi o elettroforesi su gel!
