1. Elevata solubilità: Il solfato di ammonio è altamente solubile in acqua, consentendo la creazione di soluzioni concentrate. Questa elevata solubilità consente l'aggiunta di grandi quantità di sale a una soluzione proteica, aumentando la forza ionica e promuovendo le precipitazioni proteiche.
2. Effetto salato: Il solfato di ammonio mostra un forte effetto "salting-out". Ciò significa che interrompe il guscio di idratazione attorno alle proteine, riducendo la loro solubilità e costringendole a precipitare fuori dalla soluzione. Il principio alla base di questo effetto è che gli ioni sale competono con le molecole proteiche per le molecole d'acqua, portando all'aggregazione e alle precipitazioni proteiche.
3. Precipitazione selettiva: Controllando attentamente la concentrazione di solfato di ammonio, si possono precipitare selettivamente diverse proteine in base alle loro proprietà di solubilità individuali. Ciò consente la separazione di proteine in base alle loro dimensioni, carica e idrofobicità.
4. Precipitazione delicata: Le precipitazioni di solfato di ammonio sono generalmente considerate un metodo relativamente delicato rispetto ad altre tecniche di precipitazione, come l'uso di solventi organici. Ciò lo rende adatto per preservare l'integrità e l'attività delle proteine.
5. Facilità d'uso: L'ammonio solfato è prontamente disponibile, economico e facile da usare. Viene inoltre facilmente rimosso dalla proteina precipitata mediante dialisi o altri metodi, rendendola una scelta conveniente per la purificazione delle proteine.
6. Stabilizzazione delle proteine: È interessante notare che a basse concentrazioni, il solfato di ammonio può effettivamente migliorare la stabilità delle proteine promuovendo il ripiegamento delle proteine e riducendo l'aggregazione.
7. Ampia applicabilità: La precipitazione di solfato di ammonio è una tecnica versatile applicabile a una vasta gamma di proteine, dai piccoli enzimi agli anticorpi di grandi dimensioni.
Tuttavia, esistono alcune limitazioni:
* Le alte concentrazioni di sale possono essere dannose per alcune proteine.
* Il metodo potrebbe non essere adatto a tutte le proteine, in particolare a quelle con solubilità molto bassa o alta sensibilità al sale.
Nel complesso, l'elevata solubilità, l'effetto di salto, la selettività, la facilità d'uso e l'ampia applicabilità dell'ammonio solfato lo rendono un reagente altamente efficace e comunemente usato per la precipitazione e la purificazione delle proteine.
