1. Ossidazione del fenolo per perossido di idrogeno:
* In presenza di un agente ossidante come H₂O₂, il fenolo viene ossidato a un derivato chinoneimina.
2. Reazione con 4-aminoantipirina:
* Il derivato chinoneimina reagisce con 4-AAP per formare un colorante chinoneimina colorato.
Reazione generale:
* H₂O₂ + PHENOL + 4-AAP → Dye chinoneimine + H₂O
Meccanismo:
Il meccanismo di reazione è complesso e coinvolge diversi passaggi, ma i punti chiave sono:
1. Formazione di un radicale fenoxil: H₂O₂ ossida il fenolo a un radicale fenoxil.
2. Reazione con 4-AAP: Il radicale fenoxil reagisce con 4-AAP per formare un intermedio stabilizzato dalla risonanza.
3. Ossidazione e chiusura dell'anello: L'intermedio viene ossidato da H₂O₂ per formare il colorante chinoneimina, che subisce la chiusura dell'anello.
Rilevamento colorimetrico:
Il colorante chinoneimina prodotto è altamente colorato, tipicamente rosso-arancio, con un massimo di assorbanza nella regione visibile. Ciò consente la determinazione quantitativa di H₂O₂ misurando l'assorbanza della soluzione a una lunghezza d'onda specifica usando uno spettrofotometro.
Fattori che influenzano la reazione:
* ph: La reazione viene in genere eseguita a un pH di 10,0-10,5 utilizzando una soluzione tampone.
* Temperatura: La velocità di reazione aumenta con l'aumentare della temperatura.
* Catalyst: Alcuni ioni metallici, come rame e ferro, possono catalizzare la reazione.
* Interferenza: La presenza di altri agenti ossidanti o gli agenti riducenti può interferire con la reazione.
Applicazioni:
Questa reazione è ampiamente utilizzata per:
* Determinazione della concentrazione di perossido di idrogeno in vari campioni, come fluidi biologici, campioni ambientali e processi industriali.
* Monitoraggio dell'attività degli enzimi che producono o consumano H₂O₂, come la catalasi.
* Rilevare la presenza di H₂O₂ in cibo e bevande.
Nota: Questa è una spiegazione semplificata. L'esatto meccanismo e le condizioni di reazione possono variare a seconda dell'applicazione e dei reagenti specifici utilizzati.
