Solubilità e temperatura:
* I sali di fosfato sono meno solubili a temperature più basse. Quando si conserva il tampone in frigorifero, la temperatura più fredda provoca la diminuzione della solubilità dei sali di fosfato.
* Cristallizzazione: Man mano che la solubilità diminuisce, gli ioni fosfato non possono più rimanere completamente sciolti nella soluzione. Cominciano a uscire dalla soluzione e formano cristalli.
Altri fattori:
* Concentrazione del tampone: Tamponi di fosfato più concentrati sono più inclini alla cristallizzazione perché esiste una maggiore concentrazione di ioni fosfato che possono uscire dalla soluzione.
* sali specifici: Diversi sali di fosfato hanno solubilità diverse. Ad esempio, il fosfato di sodio dibasico (Na2HPO4) è generalmente più solubile del fosfato monobasico di sodio (NAH2PO4).
* ph: Il pH del tampone può anche influenzare la solubilità.
Come prevenire la cristallizzazione:
* Concentrazione inferiore: Se possibile utilizzare una concentrazione inferiore di sali di fosfato.
* Riscaldati prima dell'uso: Prima di usare il tampone, scaldarlo a temperatura ambiente per aumentare la solubilità dei sali di fosfato.
* Usa un sistema di buffer diverso: Se hai bisogno di un tampone a pH 8,5 che è meno incline alla cristallizzazione, prendi in considerazione l'uso di un diverso sistema tampone come Tris o HEPES.
Nota importante: Se vedi cristalli nel tuo buffer, è meglio scartarlo. Mentre il tampone può essere ancora funzionale dopo aver dissolto i cristalli, la loro presenza potrebbe indicare un potenziale problema con la stabilità del tampone.