Comprensione della necessità di un vuoto/riferimento
Nella spettroscopia (UV-Vis, IR, ecc.) O Cromatografia, un vuoto o un riferimento è cruciale perché:
* corregge per l'assorbanza/interferenza di fondo: Il solvente stesso, la cuvetta o altri componenti del sistema potrebbero assorbire la luce a determinate lunghezze d'onda. Un vuoto aiuta a eliminare questi segnali dalla misurazione, isolando il segnale a causa del tuo analita.
* Imposta una base: Un riferimento stabilisce un punto di partenza per il confronto, consentendo di misurare accuratamente i cambiamenti nell'assorbanza o nell'intensità del segnale.
Scegliere il vuoto/riferimento per 80% acetone/acqua
* Blank ideale: Il vuoto ideale è una soluzione contenente * tutto tranne l'analita * nella stessa concentrazione e sistema di solvente del campione. In questo caso, il bianco sarebbe l'80% di acetone in acqua.
Perché non l'acqua pura?
* Assorbimento di acetone: L'acetone ha una significativa assorbanza nella regione UV-Vis. L'uso dell'acqua pura come vuoto comporterebbe che le misurazioni vengano distorte perché l'acetone nel campione contribuirebbe alla lettura dell'assorbanza, anche se non è l'analita.
Come preparare il vuoto:
1. Usa lo stesso solvente: Prepara il tuo bianco utilizzando la stessa miscela di acetone/acqua dell'80% che usi per i tuoi campioni.
2. Assicurati coerenza: Assicurati che il vuoto sia lo stesso volume e temperatura dei campioni per ridurre al minimo gli errori.
3. Esegui prima il vuoto: Prima di misurare i campioni, esegui il vuoto attraverso lo strumento per "zero". Questo imposta la linea di base.
Considerazioni aggiuntive:
* Interferenze da altri componenti: Se il campione contiene componenti oltre all'analita che assorbono alla stessa lunghezza d'onda, potrebbe essere necessario un approccio più sofisticato come un metodo di addizione standard per correggere queste interferenze.
* Variazioni strumentali: Lo strumento specifico che stai utilizzando può avere le sue linee guida per la preparazione e l'uso in bianco. Fare sempre riferimento al manuale del produttore per le migliori pratiche.
Esempio: Se stai analizzando una soluzione di un colorante in acetone/acqua all'80%, il bianco sarebbe acetone/acqua * senza * la tintura. Ciò ti consente di isolare il segnale di assorbanza del solo colorante.
