Nelle reazioni indipendenti dalla luce (chiamata anche il ciclo di Calvin), l'anidride carbonica si fissa a ribulosio-1,5-bisfosfato (RUBP) .

Questo processo è catalizzato dall'enzima Rubisco e provoca la formazione di un complesso a sei carbonio instabile che si rompe rapidamente in due molecole di 3-fosfoglicerato (3-PGA) .