CFU è l'acronimo di Colony Forming Units, termine in microbiologia usato per quantificare quanti batteri sono presenti in una soluzione. A seconda della concentrazione del campione, sarà necessario eseguire più diluizioni e placcare i diversi campioni sulle piastre di Petri. Se ci sono troppe colonie batteriche, saranno difficili da contare, e se ce ne sono troppe poche, il campione potrebbe non essere rappresentativo. Generalmente è una buona idea placcare la soluzione originale, quindi una diluizione 1/10 (1 parte di soluzione, 9 parti di soluzione fisiologica), una diluizione di 1/100 e una diluizione di 1/1000.

Calcolo di CFU da Diluizione batterica

Eseguire un conteggio preliminare di ciascun piatto una volta che i batteri hanno avuto il tempo di incubare, di solito uno o due giorni. Volete contare solo le singole colonie, che dovrebbero essere punti distinti, isolati, non un intero blob di diverse colonie cresciute insieme. Scegli la piastra che ha più di 30 di queste colonie ma meno di 300.

Contare il numero di singole colonie. Questo è il numero di CFU della tua diluizione: dovrai eseguire un semplice calcolo per determinare il CFU del campione originale. Per questo esempio, verrà utilizzata un'ipotetica piastra contenente 46 colonie.

Determina la dimensione della diluizione utilizzata. Idealmente, hai etichettato le capsule di Petri in anticipo. Per questo esempio, è possibile miscelare 1 ml di coltura batterica con 99 ml di soluzione fisiologica. Questa è una diluizione di 1/100.

Moltiplica il grado di diluizione in base alla quantità che hai effettivamente placcato. Se, in questo esempio, hai placcato 0,1 mL della tua diluzione 1/100 sull'agar, moltiplichi 0,1 x 1/100, per un risultato di 1/1000 o 0,001.

Dividi la CFU della diluizione (il numero di colonie che hai contato) in base al risultato del passaggio 4. Per questo esempio, devi dividere 46 per 1/1000, che equivale a moltiplicare per 1.000. Il risultato è 46.000 CFU nel campione originale.