Di Jack Brubaker
Aggiornato il 30 agosto 2022
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Nella chimica analitica, lo spettrometro ultravioletto-visibile (UV-Vis) è lo strumento standard per quantificare la quantità di luce assorbita da un campione. La quantità di assorbimento, catturata come assorbanza (A), dipende da tre variabili chiave:la concentrazione del campione (c), la lunghezza del percorso della cuvetta (l) e il coefficiente di assorbimento molare (ε), noto anche come coefficiente di estinzione molare. La relazione è espressa dalla legge di Beer:A=εcl . Per risolvere una qualsiasi di queste variabili, è necessario conoscere le altre tre.
Utilizza lo spettro di assorbanza prodotto dal tuo strumento UV-Vis. Lo spettro traccia l'assorbanza in funzione della lunghezza d'onda (nm). I picchi sul grafico indicano le lunghezze d'onda in cui il composto assorbe maggiormente; seleziona il picco che meglio corrisponde al tuo obiettivo analitico.
Determinare la molarità (M) della soluzione con la formula:
M=(grammi di soluto) ÷ (peso molecolare in gmol⁻¹) ÷ (litri di soluzione).
Ad esempio, sciogliendo 0,10 g di tetrafenilciclopentadienone (PM=384 gmol⁻¹) in 1,00 l di metanolo si ottiene:
M=0,10 g ÷ 384 gmol⁻¹ ÷ 1,00 L=2,6×10⁻⁴M.
La lunghezza del percorso ottico della cuvetta è solitamente di 1,0 cm, sebbene siano disponibili altre lunghezze, in particolare per i campioni gassosi. La lunghezza del percorso è spesso stampata sullo spettro di assorbanza o sulla cuvetta stessa.
Riorganizzare la legge di Beer per isolare ε:
ε=A ÷ (c×l)
Utilizzando l'esempio del tetrafenilciclopentadienone:compaiono due picchi a 343 nm (A=0,89) e 512 nm (A=0,35). Con una cuvetta da 1,0 cm e una concentrazione di 2,6×10⁻⁴M, i coefficienti sono:
ε(343nm)=0,89 ÷ (2,6×10⁻⁴×1,0)≈3423Lmol⁻¹cm⁻¹
ε(512nm)=0,35 ÷ (2,6×10⁻⁴×1,0)≈1346Lmol⁻¹cm⁻¹
