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  • Gli scienziati sviluppano la microscopia a forza atomica per l'imaging della dinamica su scala nanometrica dei neuroni

    Un film AFM ad alta velocità con punta lunga del bordo d'attacco di una cellula COS-7 vivente in una condizione di controllo (a sinistra) e dopo l'applicazione di citocalasina D (20 ng/mL) (a destra). Credito:Ryohei Yasuda, dottorato di ricerca, Max Planck Florida Institute for Neuroscience

    I ricercatori del Max Planck Florida Institute for Neuroscience e della Kanazawa University (Giappone) sono riusciti a visualizzare le dinamiche strutturali dei neuroni viventi con una risoluzione spaziale senza precedenti.

    Sebbene negli ultimi decenni siano stati compiuti progressi nella ricerca dell'ottimizzazione della microscopia a forza atomica (AFM) per l'imaging di cellule viventi, c'erano ancora una serie di limitazioni e problemi tecnologici che dovevano essere affrontati prima che le questioni fondamentali nella biologia cellulare potessero essere affrontate nelle cellule viventi.

    Nella loro pubblicazione di marzo in Rapporti scientifici , i ricercatori del Max Planck Florida Institute for Neuroscience e della Kanazawa University descrivono come hanno costruito il nuovo sistema AFM ottimizzato per l'imaging di cellule vive. Il sistema differisce in molti modi da un AFM convenzionale:utilizza un ago estremamente lungo e affilato attaccato a una piastra altamente flessibile. Il sistema è inoltre ottimizzato per la scansione rapida per acquisire eventi cellulari dinamici. Queste modifiche hanno permesso ai ricercatori di visualizzare le cellule viventi, come linee cellulari di mammifero o neuroni ippocampali maturi, senza alcun segno di danno cellulare.

    "Ora abbiamo dimostrato che il nostro nuovo AFM può visualizzare direttamente i cambiamenti morfologici su scala nanometrica nelle cellule viventi", ha spiegato il dottor Yasuda, neuroscienziato e direttore scientifico del Max Planck Florida Institute for Neuroscience.

    In particolare, questo studio dimostra la capacità di tracciare le dinamiche strutturali e il rimodellamento della superficie cellulare, come la morfogenesi dei filopodi, increspature della membrana, formazione di fossette o endocitosi, in risposta a stimolanti ambientali. Un esempio di questa capacità può essere visualizzato nel filmato 1, dove viene ripreso un fibroblasto prima e dopo il trattamento con l'ormone dell'insulina, che esalta intensamente l'increspatura al bordo anteriore della cella. Un altro esempio è visto nel film 2, dove si osservano i cambiamenti morfologici di una protrusione neuronale simile a un dito nel neurone ippocampale maturo.

    Un lungo filmato AFM ad alta velocità di un neurone ippocampale in coltura vivente a 15 DIV. Credito:Ryohei Yasuda, dottorato di ricerca, Max Planck Florida Institute for Neuroscience

    Secondo il dottor Yasuda, le osservazioni riuscite delle dinamiche strutturali nei neuroni vivi presentano la possibilità di visualizzare la morfologia delle sinapsi a risoluzione nanometrica in tempo reale nel prossimo futuro. Poiché i cambiamenti morfologici delle sinapsi sono alla base della plasticità sinaptica e del nostro apprendimento e memoria, questo ci fornirà molte nuove intuizioni sui meccanismi di come i neuroni immagazzinano le informazioni nella loro morfologia, come cambia la forza sinaptica e in definitiva come crea nuova memoria.

    Un film AFM ad alta velocità con punta lunga del bordo anteriore di una cellula COS-7 vivente in una condizione di controllo (a sinistra) e dopo l'aggiunta di insulina (20 μg/mL) (a destra). Credito:Ryohei Yasuda, dottorato di ricerca, Max Planck Florida Institute for Neuroscience



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