Attrezzatura:
- Microscopio:un microscopio ad alta potenza dotato di funzionalità di imaging con contrasto di interferenza differenziale (DIC) o contrasto di fase. Ciò ti consentirà di visualizzare i batteri e le cellule immunitarie in dettaglio.
- Fotocamera:una fotocamera ad alta risoluzione in grado di catturare immagini o video con un frame rate elevato.
- Computer:un computer con software di elaborazione e modifica delle immagini.
- Piastre o vetrini per coltura:piastre per coltura sterili o vetrini per microscopio per far crescere i batteri e osservare la risposta immunitaria.
- Coltura batterica:una coltura dei batteri che si desidera osservare, come E. coli o S. aureus.
- Cellule immunitarie:una coltura di cellule immunitarie, come macrofagi o neutrofili.
Procedura:
1. Prepara i piatti culturali :Posizionare un vetrino coprioggetto in una piastra di coltura e aggiungere una goccia della coltura batterica. Incubare il piatto per alcune ore per consentire ai batteri di crescere e diffondersi.
2. Aggiungi cellule immunitarie :Aggiungere con cautela una goccia della coltura delle cellule immunitarie alla piastra di coltura contenente i batteri. Rimetti la capsula nell'incubatrice per altre ore per consentire alle cellule immunitarie di interagire con i batteri.
3. Imposta il microscopio: Posizionare il microscopio sopra la capsula di coltura e regolare la messa a fuoco per ottenere una visione chiara dei batteri e delle cellule immunitarie. Abilitare l'imaging DIC o con contrasto di fase, se disponibile.
4. Cattura immagini o video :utilizzare la fotocamera per catturare immagini o video dell'interazione tra i batteri e le cellule immunitarie. Potrebbe essere necessario regolare le impostazioni di illuminazione, messa a fuoco ed esposizione per ottenere risultati ottimali.
5. Elabora e analizza le immagini o i video :trasferire le immagini o i video acquisiti sul computer ed elaborarli utilizzando il software di elaborazione delle immagini. È possibile utilizzare questo software per migliorare il contrasto, regolare i colori e rimuovere il rumore dalle immagini o dai video. Puoi anche analizzare le immagini o i video per misurare parametri come il numero di batteri, il numero di cellule immunitarie e il tasso di uccisione dei batteri.
Questo approccio consente di visualizzare e registrare le interazioni tra batteri e cellule immunitarie in tempo reale, fornendo informazioni sui meccanismi attraverso i quali il nostro sistema immunitario uccide i batteri.
