1. Estrazione del DNA: Il DNA viene estratto dalle due specie da confrontare.
2. Frammentazione: Il DNA viene tagliato in frammenti più piccoli usando enzimi di restrizione.
3. Denaturazione: Il DNA a doppio filamento viene riscaldato per separare i fili (denaturazione).
4. Ibridazione: I frammenti di DNA a singolo filamento delle due specie vengono miscelati e lasciati raffreddare. Sequenze complementari delle diverse specie si legaranno tra loro, formando molecole di DNA ibride.
5. Misurazione: La forza dell'ibridazione viene misurata determinando la temperatura di fusione (TM) del DNA ibrido. Valori TM più elevati indicano un'ibridazione più forte e quindi una maggiore somiglianza tra le sequenze.
Come TM si riferisce alla relazione genetica:
* TM alto: Se le sequenze di DNA sono molto simili, il DNA ibrido sarà molto stabile e avrà un TM elevato. Ciò indica una stretta relazione evolutiva.
* bassa tm: Se le sequenze di DNA sono meno simili, il DNA ibrido sarà meno stabile e avrà una TM inferiore. Ciò indica una relazione evolutiva più lontana.
Interpretazione dei risultati:
Confrontando i valori TM di diverse specie, gli scienziati possono stimare la relazione genetica tra loro. Ad esempio, le specie con sequenze di DNA molto simili (TM elevata) sono probabilmente strettamente correlate, mentre le specie con sequenze di DNA meno simili (TM bassa) sono probabilmente più correlate.
Limitazioni:
* Non sempre preciso: Il metodo non è sempre perfettamente accurato. Fattori come la lunghezza dei frammenti di DNA e la presenza di sequenze ripetitive possono influenzare i risultati.
* limitato dai dati disponibili: La tecnica si basa sul confronto di sequenze di DNA specifiche, che potrebbero non essere rappresentative dell'intero genoma.
Conclusione:
L'ibridazione del DNA è un potente strumento per misurare la relazione genetica tra le specie. Fornisce una visione preziosa delle relazioni evolutive confrontando il grado di somiglianza tra le loro sequenze di DNA. Tuttavia, è importante notare che questo metodo ha limiti e dovrebbe essere interpretato con cautela.
