1. Medium di crescita: LB Agar fornisce un ambiente ricco di nutrienti per la crescita e la moltiplicazione dei batteri. Contiene nutrienti essenziali come triptone, estratto di lievito e cloruro di sodio, che supportano la crescita batterica e la divisione.
2. Selezione e identificazione: Le piastre LB possono essere integrate con antibiotici specifici, come ampicillina o kanamicina. Ciò consente la selezione di colonie batteriche che sono state trasformate con un plasmide contenente il gene di resistenza agli antibiotici. Solo i batteri che trasportano il plasmide sopravviveranno sulla piastra LB contenente antibiotici, consentendo l'identificazione di cellule trasformate con successo.
Nel processo di realizzazione di celle competenti, vengono utilizzate piastre LB per:
* Batteri in crescita: I batteri iniziali vengono prima coltivati su piastre LB per ottenere un gran numero di cellule.
* Selezione di cellule trasformate: Dopo la trasformazione, i batteri sono placcati su piastre LB contenenti l'antibiotico appropriato. Solo le cellule trasformate che trasportano il gene della resistenza crescono, formando colonie.
Aspetti chiave delle piastre LB nella creazione di celle competenti:
* Composizione: L'agar LB in genere contiene triptone all'1%, estratto di lievito allo 0,5%, 1% di NaCl e 1,5% di agar.
* Temperatura: Le piastre LB sono generalmente incubate a 37 ° C, la temperatura ottimale per la crescita batterica.
* Selezione antibiotica: L'antibiotico specifico utilizzato dipende dal plasmide utilizzato per la trasformazione.
* Formazione di colonie: Dopo l'incubazione, i batteri trasformati formeranno colonie visibili sulla piastra LB, che possono quindi essere ulteriormente analizzate.
In sintesi: Le piastre LB forniscono un mezzo adatto per la crescita batterica e consentono la selezione di cellule trasformate in base alla resistenza agli antibiotici. Sono uno strumento essenziale nel processo di realizzazione di cellule competenti per la clonazione genica e altre tecniche di biologia molecolare.
