Quando si verifica l'effetto del pH sull'attività enzimatica, è necessario variare il pH. Tuttavia, puoi farlo in modi buoni o cattivi. Tieni presente quali fattori extra possono confondere gli effetti del pH variabile. In caso contrario, i risultati ottenuti potrebbero non essere dovuti al cambiamento del pH, ma a un altro fattore. Sapere come variare correttamente il pH e quali fattori confondono il pH di un esperimento ti aiuterà a ottenere buoni risultati e capire perché i tuoi risultati potrebbero non essere esattamente come ti aspettavi.
Cambia solo una cosa
Durante i test l'effetto del pH sull'attività enzimatica, varia solo il pH mantenendo costanti altri fattori. Questi altri fattori includono la concentrazione dell'enzima, la concentrazione del substrato e la temperatura. I fattori che rimangono costanti sono chiamati variabili di controllo. Le variabili di controllo consentono di concludere che i risultati sull'attività enzimatica ottenuti nel tuo esperimento sono dovuti alla variazione del pH, la variabile indipendente. Sapere quali fattori non devono cambiare in un esperimento è tanto importante quanto sapere quale fattore variare, altrimenti sarà difficile stabilire se i risultati siano effettivamente dovuti a una cosa che è stata testata.
Scegli un solo acido O una base
Il pH di una soluzione può essere modificato sciogliendo diverse quantità di acido o una base in acqua. Un modo per testare l'effetto del pH sull'attività enzimatica è aggiungere gradualmente gocce di un acido forte o una base forte nella soluzione che contiene l'enzima e quindi osservare il punto in cui l'attività enzimatica rallenta o si ferma. Un acido è definito come un composto che dona uno ione idrogeno, chiamato protone (H +), e una base è definita come un composto che dona uno ione idrossido (-OH). Diversi acidi e basi hanno un numero diverso di protoni o ioni idrossido da regalare. Non tutti i protoni o gli ioni idrossido vengono immediatamente donati quando un acido o una base vengono aggiunti a una soluzione, ma il numero di protoni donati o di ioni idrossido cambia il pH a velocità diverse. Pertanto, è una buona idea variare il pH in un esperimento enzimatico usando solo un tipo di acido o un tipo di base. Altrimenti, altre variabili vengono aggiunte involontariamente.
Anche i tessuti cambiano pH
Alcuni esperimenti di laboratorio che studiano l'attività enzimatica coinvolgono la macinazione di tessuti freschi per rilasciare gli enzimi dalle cellule e quindi aggiungere substrato per misurare l'enzima attività. Il tessuto fresco contiene sangue. A causa della presenza di enzimi nel sangue che modificano il gas di anidride carbonica che si scioglie nel sangue in acido carbonico, il tessuto stesso può influenzare il pH. Pertanto, in esperimenti che coinvolgono l'attività enzimatica nel tessuto fresco, è utile lavare il sangue in un becher di acqua fredda prima di macinare il tessuto. Ciò ridurrà al minimo il cambiamento involontario del pH dovuto al tessuto, in modo che possa essere studiato il cambiamento mirato del pH.
Mantenere le dimensioni uguali a
Come discusso sopra, la concentrazione dell'enzima è un controllo fattore che non dovrebbe essere variato quando si verifica l'effetto del pH sull'attività enzimatica. Tuttavia, le procedure sperimentali variano ancora intrinsecamente la concentrazione dell'enzima in modi sottili. Se si sta utilizzando una soluzione pura di enzimi, mantenendo costante la concentrazione dell'enzima. Tuttavia, in esperimenti in cui l'enzima proviene da tessuto fresco, come pezzetti di patata, pezzi di piante o pezzi di fegato, la dimensione dei pezzi modifica la quantità di enzima in ogni provetta. Pertanto, sarà utile tagliare i pezzi di tessuto nel modo più uniforme possibile. Questo è un altro esempio di come sapere cosa non cambiare e perché sia difficile non evitare di cambiare completamente, aiuta a interpretare i risultati di un fattore variabile come il pH.
