Comprensione delle basi
* tampone fosfato di sodio: Questo tampone è in genere realizzato usando una miscela di fosfato di sodio monobasico (NAH2PO4) e fosfato di sodio dibasico (Na2HPO4). Questi due componenti agiscono come una coppia coniugata acido-base, consentendo alla soluzione di resistere ai cambiamenti del pH.
* ph 6.9: Il pH desiderato del tuo buffer. Ciò determinerà il rapporto tra NaH2PO4 e Na2HPO4 necessario.
* 0,006 m NaCl: Questa è semplicemente una soluzione salina aggiunta al tampone. Non influenza direttamente il pH del tampone ma potrebbe essere utilizzato per esigenze sperimentali specifiche.
passaggi per preparare il buffer
1. Calcola le masse richieste:
* Determina il PKA: Il rilevante PKA per il tampone fosfato è 7,21 (il PKA dell'equilibrio H2PO4- / HPO42). Questo è vicino al pH desiderato, rendendolo una buona scelta.
* Usa l'equazione di Henderson-Hasselbalch:
* ph =pka + log ([hpo42-] / [h2po4-])
* 6.9 =7.21 + log ([HPO42-] / [H2PO4-])
* Risolvi per il rapporto:[HPO42-] / [H2PO4-] =0,50
* Calcola la molarità di ciascun componente fosfato:
* Molarità fosfato totale =0,02 m
* [Na2HPO4] =0,02 m * (0,50 / 1,50) =0,0067 m (approssimativamente)
* [NAH2PO4] =0,02 m * (1,00 / 1,50) =0,0133 m (approssimativamente)
* Converti le molarità in grammi:
* Avrai bisogno dei pesi molecolari di NaH2PO4 (119,98 g/mol) e Na2HPO4 (141,96 g/mol).
* Calcola la massa necessaria per ciascun componente usando la seguente formula:massa =(molarità * volume * peso molecolare) / 1000
* Ad esempio, per NAH2PO4, se si desidera creare 1 L di buffer:
* Massa =(0,0133 mol/l * 1 l * 119,98 g/mol)/1000 =1,59 g
* Calcola in modo simile la massa di Na2HPO4.
2. Sciogliere i sali in acqua:
* Pesare le quantità calcolate di NaH2PO4 e Na2HPO4.
* Dissolvili in circa 800 ml di acqua distillata.
* Aggiungi la massa calcolata di NaCl alla soluzione e mescola per dissolversi.
* Utilizzare un agitatore magnetico o una barra di agitazione per garantire una miscelazione accurata.
3. Regola il pH (opzionale):
* Utilizzare un pHmetro per controllare il pH della soluzione.
* Se il pH non è esattamente 6,9, è possibile regolare leggermente aggiungendo piccole quantità di HCl da 1 M (per abbassare il pH) o 1 m NaOH (per aumentare il pH). Aggiungi queste soluzioni a discesa durante il monitoraggio del pH con un contatore.
4. Porta la soluzione al volume finale:
* Una volta regolato il pH, aggiungere attentamente l'acqua distillata per portare il volume totale della soluzione a 1 L.
5. Controlla e archivia:
* Controlla il pH ancora una volta per assicurarsi che sia corretto.
* Conserva il tuo tampone a temperatura ambiente o in frigorifero per una conservazione più lunga.
Considerazioni importanti
* Qualità dell'acqua: Utilizzare acqua distillata di alta qualità per i migliori risultati.
* Precisione: Pesare con precisione i sali per garantire la corretta concentrazione del tampone.
* Calibrazione del pH Meter: Calibrare correttamente il misuratore di pH prima dell'uso per misurazioni accurate.
* Sicurezza: Indossare sempre attrezzature di sicurezza appropriate (guanti, occhiali) durante la gestione dei prodotti chimici.
Questa procedura dovrebbe fornire una soluzione tampone fosfato di sodio 0,02 M a pH 6,9 con NaCl 0,006 M. Ricorda di regolare i volumi e i calcoli se è necessario fare un volume diverso di buffer.
