Comprensione delle basi
* Glycine: La glicina è un aminoacido con un PKA di 9.6. Questo lo rende adatto per il tampone intorno al pH 9.2.
* idrossido di sodio (NaOH): NaOH è una base forte utilizzata per regolare il pH della soluzione di glicina al 9.2 desiderato.
Materiali:
* Glicina (solido)
* Idrossido di sodio (NaOH) (solido o soluzione)
* Acqua deionizzata
* PH METTER (o carta indicatore di pH)
* Flaccuggino volumetrico (1 L)
* Cilindro graduato
* Apparato mescolato (agitatore magnetico e barra di agitazione o becher e asta di mescola)
Procedura:
1. Calcola la quantità di glicina necessaria:
* Il peso molecolare della glicina è 75,07 g/mol.
* Per creare una soluzione da 1 m, avrai bisogno di 75,07 g di glicina per litro di soluzione.
* Pesare 75,07 g di glicina.
2. Sciogliere la glicina:
* Trasferisci la glicina su un pallone volumetrico da 1 l.
* Aggiungi circa 800 ml di acqua deionizzata al pallone.
* Mescola la soluzione con un agitatore magnetico o l'asta mescolata fino a quando la glicina non viene completamente sciolta.
3. Regola il pH:
* usando un pH meter:
* Aggiungi attentamente piccole parti di soluzione NaOH alla soluzione di glicina mentre monitora il pH con il misuratore.
* Aggiungere lentamente la soluzione NaOH, mescolando continuamente, fino a quando il pH non raggiunge 9,2.
* usando la carta indicatore di pH:
* Aggiungi piccole porzioni di soluzione NaOH alla soluzione di glicina, mescolando continuamente e controllando il pH con la carta indicatore.
* Continua ad aggiungere NaOH fino a quando la carta indicatore non corrisponde al pH desiderato 9.2.
4. Porta il volume a 1 L:
* Una volta regolato il pH a 9.2, aggiungi abbastanza acqua deionizzata al pallone per portare il volume totale a 1 L.
* Mescola accuratamente la soluzione.
Note importanti:
* Sicurezza: Indossa sempre gli occhiali e i guanti di sicurezza sempre adeguati quando si maneggiano sostanze chimiche.
* Precisione: Utilizzare un equilibrio calibrato per la precisione per pesare la glicina.
* Regolazione del pH: Aggiungi la soluzione NaOH lentamente e attentamente per evitare di superamento del pH desiderato.
* Storage: Conservare la soluzione tampone in un contenitore strettamente sigillato a temperatura ambiente.
Suggerimenti aggiuntivi:
* Se hai bisogno di un volume specifico di buffer (ad es. 500 ml), regolare la quantità di glicina e NaOH di conseguenza.
* Se non hai un pHmetro, puoi usare una carta indicatore di pH. Tuttavia, l'accuratezza del buffer sarà inferiore.
* Il pH del tampone cambierà leggermente con la temperatura.
Questa procedura ti dà un tampone glicina-Naoh da 1 m a circa pH 9.2. Se hai bisogno di un pH altamente preciso, potrebbe essere necessario regolare leggermente la concentrazione di NaOH dopo aver controllato con un pH metro.
