Ecco come funziona:
1. Reazione: Il reagente DNS, contenente acido 3,5-dinitrosalicilico, è riscaldato in presenza di uno zucchero riducente.
2. Riduzione: Lo zucchero riducente (come glucosio, fruttosio o maltosio) riduce i DN di colore giallo al 3-amino-5-NSA di colore marrone.
3. Formazione del colore: L'intensità del colore marrone prodotto è direttamente proporzionale alla concentrazione dello zucchero riducente presente.
4. Misurazione: L'assorbanza della soluzione viene misurata a una lunghezza d'onda specifica (in genere 540 nm) usando uno spettrofotometro. Questa assorbanza viene quindi utilizzata per quantificare la quantità di zucchero riducente presente nel campione.
Principi chiave:
* Reazione redox: La reazione tra DNS e lo zucchero riducente è una reazione redox, in cui il DNS viene ridotto e lo zucchero viene ossidato.
* Dosaggio colorimetrico: Il cambiamento di colore dal giallo al marrone fornisce un'indicazione visiva della concentrazione di zucchero riducente.
* Legge di birra-lambert: L'assorbanza misurata è direttamente proporzionale alla concentrazione del prodotto colorato, seguendo la legge della birra-lambert.
Vantaggi del metodo DNS:
* semplice ed economico: Il metodo è relativamente semplice e utilizza reagenti prontamente disponibili.
* alta sensibilità: Il metodo DNS è abbastanza sensibile da rilevare basse concentrazioni di zuccheri riducenti.
* ampiamente applicabile: Può essere usato per misurare le concentrazioni di zucchero riducendo in una varietà di campioni, tra cui fluidi biologici, prodotti alimentari e campioni industriali.
Limitazioni del metodo DNS:
* Interferenza mediante zuccheri non riducenti: Gli zuccheri non riducenti come il saccarosio non reagiscono con i DN.
* Specificità: Il metodo non è specifico per un singolo zucchero riducente. Misura il contenuto di zucchero riducente totale.
* Sensibilità alla temperatura: La velocità di reazione è sensibile alle variazioni di temperatura.
Nel complesso, il metodo colorimetrico DNS è un metodo ampiamente utilizzato, affidabile e conveniente per quantificare la riduzione del contenuto di zucchero in vari campioni. Tuttavia, i suoi limiti dovrebbero essere considerati durante l'interpretazione dei risultati.
