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La cromatografia su carta è una tecnica analitica fondamentale che separa miscele complesse in singoli componenti. Il metodo si basa sulla migrazione differenziale dei composti lungo una fase stazionaria, in genere un sottile strato di carta assorbente, guidata da un solvente della fase mobile. Poiché richiede un'attrezzatura minima, è ampiamente utilizzato nei laboratori didattici e nelle analisi rapide sul campo.
Per assemblare un cromatografo a casa, acquista carta per cromatografia (comunemente disponibile nei kit scientifici) e seleziona gli inchiostri da tre penne distinte. Contrassegna ogni macchia di inchiostro con un'etichetta numerata. Metti la carta in un contenitore di vetro poco profondo, aggiungi il solvente fino a quando il livello del liquido tocca appena il bordo superiore della carta e sigilla il contenitore con pellicola trasparente. Il sigillo crea un ambiente saturo di solvente che rallenta l'evaporazione e garantisce una migrazione coerente.
Mentre il solvente sale, dissolve i costituenti dell'inchiostro. I composti che interagiscono fortemente con la carta (polarità maggiore o dimensione molecolare maggiore) viaggiano più lentamente, rimanendo più vicini alla base. Al contrario, i pigmenti che si dissolvono facilmente nel solvente si muovono verso l'alto, creando bande discrete che possono essere tracciate o fotografate.
Una volta che la parte anteriore del solvente raggiunge la parte superiore, sollevare la carta e lasciarla asciugare. Misura la distanza percorsa da ciascuna banda dall'origine. Il rapporto tra queste distanze:Rf valore:è caratteristico di ciascun pigmento e può essere confrontato con i riferimenti standard (ad esempio, Wikipedia ) per confermare l'identità.
La separazione si basa su due principi:
Pertanto, il colore di una penna è spesso una miscela di coloranti con pesi molecolari e solubilità variabili, che portano alle bande distinte osservate.
In alcuni casi, i pigmenti o le piccole molecole potrebbero non essere visibili da sole. Mescolando il campione con un colorante visibile o un colorante alimentare è possibile rivelare componenti altrimenti nascosti, come alcuni amminoacidi. Inoltre, identico Rf i valori indicano la comigrazione di composti simili, ma le sottili differenze a volte possono essere risolte con documenti a risoluzione più elevata o rilevatori avanzati.