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  • Un nuovo metodo per il rilevamento rapido di un antivirale chiave

    Sviluppo di un nuovo test immunocromatografico su striscia a flusso laterale basato su nanocorpo per il rilevamento rapido dell'interferone umano ricombinante α2b. Credito:Journal of Pharmaceutical Analysis

    Gli interferoni sono proteine ​​che costituiscono una parte importante dei nostri sistemi di difesa naturali. Queste proteine ​​esibiscono anche una notevole attività antivirale. L'interferone umano ricombinante α2b (rhIFNα2b) è stato approvato dalla Food and Drug Administration statunitense nel 1986. Da allora è stato utilizzato come agente antivirale per il trattamento dell'epatite B e dell'epatite C. Nonostante le sue applicazioni diffuse, tuttavia, rimane un problema:il rilevamento di rhIFNα2b è noioso e richiede tempo.

    In questo contesto, i ricercatori cinesi, in un nuovo studio, hanno recentemente sviluppato un nuovo metodo per il rilevamento rapido ed efficiente di rhIFNα2b. Questo documento è stato reso disponibile online l'8 luglio 2021 ed è stato pubblicato nel Journal of Pharmaceutical Analysis il 30 aprile 2022.

    Per sviluppare il loro nuovo metodo, hanno immobilizzato un nuovo nanobody su una striscia di carta. Il nanocorpo utilizzato in questo metodo era originariamente derivato da un Alpaca, una specie del mammifero camelide sudamericano. Successivamente, è stato generato nel laboratorio di ricerca utilizzando la tecnologia del DNA ricombinante, una tecnica utilizzata per subclonare frammenti di DNA al fine di ottenere elevate quantità di proteine ​​sintetiche. Questo di solito si ottiene usando batteri o altre cellule procariotiche. Un nanobody è un frammento funzionale di un anticorpo più grande. Poiché il nuovo nanocorpo immobilizzato si lega saldamente a rhIFNα2b e con un'elevata specificità, è stato utilizzato per un rilevamento rapido e infallibile di rhIFNα2b.

    Secondo il Dr. Junzhi Wang, "A causa dei vantaggi dei nanobodies nella conservazione, produzione e costo dei reagenti, il test immunocromatografico a flusso laterale che utilizza nanobodies ha un alto potenziale per sostituire i tradizionali test di legame del ligando basati su anticorpi per un test di identificazione rapida di terapia proteica ricombinante."

    Il team di ricerca ha caratterizzato il legame per l'interazione I22-rhIFNα2b, ovvero il legame tra nanobody 122 e rhIFNα2b, utilizzando una piattaforma Octet. I dati ottenuti indicavano chiaramente un legame stretto. La specificità del legame è stata ulteriormente convalidata utilizzando il Western blotting, una tecnica utilizzata per rilevare le proteine ​​utilizzando anticorpi specifici per le proteine.

    "I prodotti rhIFNα2b attualmente disponibili in Cina includono iniezioni, polveri per iniezione, gel e paste. Le strisce immunocromatografiche possono essere utilizzate solo per valutare liquidi o prodotti in polvere che possono essere sciolti e applicati alle strisce. Questo perché il prodotto ha bisogno di diffondersi lungo la striscia attraverso un'azione capillare; gel e paste non soddisfano questo requisito", spiega il dott. Wang.

    Abbastanza interessante, il saggio di rilevamento rhIFNa2b sviluppato ha un limite di rilevamento di 1 µ g/mL, che è inferiore ai limiti esistenti. Ciò la rende una tecnica di laboratorio più sensibile per la rapida identificazione di rhIFNα2b. Un altro grande vantaggio è l'uso di nanocorpi per il rilevamento delle proteine. Questo perché i nanocorpi possono essere ottenuti in modo economico raccogliendo cellule batteriche poco costose. Inoltre, grandi volumi di nanocorpi possono essere ottenuti con relativa facilità utilizzando tecniche di laboratorio utilizzate di routine.

    Il Dr. Wang afferma:"Il tempo di funzionamento dell'identificazione di rhIFNα2b è stato ridotto da due giorni a pochi minuti con il nostro test. Può, quindi, soddisfare le esigenze di rilevamento rapido di questa famiglia di prodotti proteici ricombinanti sul mercato e fornire una buona base per migliorare l'efficienza del rilevamento di contraffazioni sul mercato. In futuro, il rilevamento rapido potrebbe essere effettuato in modo completo."

    In sintesi, il metodo di nuova concezione potrebbe aprire la strada a un rilevamento più agevole, rapido e accurato delle proteine ​​ricombinanti o generate artificialmente, rendendo possibile la diagnosi precoce e il trattamento dell'epatite. + Esplora ulteriormente

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