La biochimica studia molecole come DNA, RNA e proteine. Le tecniche di blotting sono ciò che gli scienziati usano per separare questi tipi di molecole. Nelle cellule, esistono come una miscela. Il blotting consente ai ricercatori di trovare una proteina tra molte, come un ago in un pagliaio. Il blotting viene generalmente fatto lasciando passare una miscela di DNA, RNA o proteine ​​attraverso una lastra di gel. Questo gel consente alle piccole molecole di muoversi più rapidamente di quelle più grandi. Le molecole separate vengono quindi premute contro una membrana, che aiuta a spostare le molecole dal gel sulla membrana. Le molecole si attaccano alla membrana, ma rimangono nella stessa posizione, l'una dall'altra, come se fossero ancora nel gel.

Western Blot

Il western blotting è una tecnica comune per separare proteine ​​per dimensione, ma in colonne dritte. Queste colonne parallele consentono ai ricercatori di confrontare la quantità di una proteina tra diversi campioni che vengono eseguiti uno accanto all'altro, come le piste da bowling. Ad esempio, se si testasse l'effetto di diverse quantità di un farmaco sulla crescita cellulare, si tratterebbe di trattare quattro diversi gruppi di cellule con una diversa quantità di farmaco. Quindi è possibile rompere le cellule aperte e gestire le proteine ​​di ciascun gruppo in corsie separate su un gel. Diffondere le proteine ​​in questo modo ti permette di vedere cosa fa una concentrazione crescente di farmaci per una determinata proteina.

Northern Blot

Il Northern blotting è usato per rilevare l'RNA. Le cellule possono essere aperte per rilasciare il loro RNA. L'RNA da diversi tipi di cellule può essere eseguito su corsie separate su un gel. Il gel diffonde il diverso RNA per dimensione. Queste file ordinate e parallele di RNA consentono a un ricercatore di confrontare quale tipo di cellula ha la quantità di quale RNA. Questo metodo consente a un ricercatore di determinare se le cellule di una certa malattia hanno più di questo RNA o meno di quell'RNA. Il Northern blotting può rivelare come una malattia sta funzionando a livello di produzione di RNA.

Southern Blot

Southern blotting è la tecnica di blotting originale, che ha dato il via al sistema di denominazione. È stato inventato da Edwin Southern. Il Southern blot viene utilizzato per rilevare la quantità di DNA in una miscela. Proprio come con le proteine ​​e l'RNA, il DNA di una cellula può essere rilasciato quando quella cellula viene aperta. Il Southern blotting separa il DNA da diversi tipi di cellule per dimensione. Il DNA di ciascun campione è distribuito in corsie ordinate e parallele. Singoli pezzi di DNA possono essere rilevati utilizzando una sonda radioattiva o fluorescente, progettata per legarsi solo a quel pezzo di DNA. Il segnale di energia proveniente da una sonda radioattiva, o i lampi di luce di un segnale fluorescente, dicono ai ricercatori quanto di quel pezzo di DNA è presente in ogni campione.

Altre macchie

I tre principali le tecniche - occidentale, settentrionale e meridionale - sono state modificate in diversi modi per rilevare molecole leggermente diverse. Ogni tecnica modificata viene generalmente eseguita nel modo consueto, ma utilizza un metodo diverso per rilevare la molecola che viene diffusa nelle corsie parallele. Le macchine del sud-ovest rilevano molecole di proteine ​​attaccate al DNA. Le macchie nord-occidentali rilevano molecole di proteine ​​attaccate all'RNA. Le macchine del Farwestern rilevano molecole di proteine ​​bloccate su altre proteine.