Valutazione di P22 mAbs mediante analisi Western blot e saggio di immunoassorbimento enzimatico bloccante (ELISA). A) Analisi Western blot della specificità degli anticorpi monoclonali P22 (mAbs) per la proteina P22 mirata. La lettera in stampatello tra due numeri nell'angolo inferiore di ciascuna immagine, rappresenta il nome di mAb, KDa =kilo Dalton, M =marker, Lane-1 =proteina P22 ricombinante caricata con 15 µl a una concentrazione di 1 mg/ml e Lane- 2 =proteina legante il maltosio (MBP) come controllo negativo. Questi risultati hanno mostrato che tutti i mAb erano altamente specifici e riconoscevano la proteina P22 marcata con MBP al peso previsto di circa 66 KDa. B) Valutazione di sette P22-mAb (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 e 4B6) per la loro applicazione nel blocco ELISA utilizzando sei campioni di siero di maiale positivi e quattro negativi al virus della peste suina africana (ASFV) e tutti loro sono stati inibiti a legare il loro antigene rivestito target dai campioni di siero positivi con PI medio> 92%. I dati rappresentano la media dei risultati di tre esperimenti indipendenti. Credito:Biosicurezza e salute (2022). DOI:10.1016/j.bsheal.2022.04.002
La peste suina africana (PSA) è una malattia altamente infettiva e mortale dei suini. A causa della complessità del virus ASF (ASFV) e delle varie forme cliniche della malattia, è necessaria un'ampia gamma di test sierodiagnostici altamente efficaci e robusti.
L'uso delle proteine ASFV più antigeniche è estremamente cruciale per migliorare i test siero-diagnostici. Attualmente, solo poche proteine ricombinanti altamente antigeniche sono state testate e convalidate per l'uso come reagenti nei test siero-diagnostici di PSA. Finora sono stati approvati tre kit ELISA basati sulle proteine ricombinanti P72, P30 e PP62.
In un nuovo studio pubblicato su Biosafety and Health basato sulla proteina P22 ricombinante, è stato sviluppato un test ELISA bloccante basato su anticorpi monoclonali P22 altamente sensibile, specifico e rapido (mAb-bELISA) per rilevare gli anticorpi sierici indotti da ASFV di genotipo I e II per rilevare gli anticorpi ASFV. Un totale di 806 campioni di siero di maiale sono stati testati per valutare le prestazioni del test diagnostico. Il test è stato in grado di rilevare gli anticorpi ASFV già 9 giorni dopo l'infezione.
Sulla base di questo studio, il test bELISA basato su P22-mAb innovativo può essere utilizzato per il rilevamento rapido e accurato di anticorpi contro l'ASFV, che svolgerà un ruolo prezioso nel contenimento e nella prevenzione dell'ASF come alternativa ad altri metodi diagnostici sierologici. Inoltre, questo studio aiuterà i ricercatori a studiare ulteriormente l'importanza immunogenica della proteina P22 nell'infezione da ASFV. + Esplora ulteriormente
